[发明专利]一种基于花药培养的红掌脱毒方法

说明书

本发明提供了一种基于花药培养的红掌脱毒方法，该脱毒方法详细步骤包括：（1）红掌花序的取材与预处理；（2）无菌花药的获得与接种；（3）花药诱导培养；（4）愈伤组织分化培养（5）壮苗生根培养；（6）炼苗与移栽；（7）红掌单倍体植株的剔除。本发明的脱毒原理是通过花药培养途径获得了红掌花粉植株，花粉植株几乎不含病毒，再剔除花培群体中的单倍体杂株，从而获得脱毒的红掌正常倍性植株。本发明操作简便，生产技术要求低，脱毒效率高，经检测脱毒率几乎可达100%，能够满足红掌脱毒苗规模化生产的需要。

技术领域

本发明涉及一种基于花药培养的红掌脱毒方法，尤其涉及一种通过花药离体培养途径高效获得红掌脱毒种苗的方法，属于园艺科学领域。

背景技术

红掌 (Anthurium andraeanum Linden)又名花烛、安祖花，为天南星科花烛属多年生常绿草本植物，红掌的叶呈心形、墨绿、革质、有天鹅绒般的金属光泽，叶柄纤细硬朗；红掌的花朵由鲜猩红色的佛焰苞和橙红色的肉穗花序组成，花序螺旋状卷曲，花苞蜡质、形似手掌，整朵花光彩夺目，风姿楚楚，给人以明快、热烈的感受；红掌的花梗韧性好，每朵花的花期一般可达一个月，全年均可开花，因此红掌是一种较为珍稀的观花观叶两者兼宜的观赏植物，具有极高的观赏价值。

野生红掌原产于哥斯达黎加、哥伦比亚等热带雨林区，常附生在树上，有时附生在岩石上或直接生长在地上，1896年由法国著名植物学家自哥伦比亚西南部的热带雨林引种到欧洲，20世纪60年代盛行欧美各国，此后欧洲、亚洲、非洲皆有广泛栽培，在许多国家和地区已经成为仅次于热带兰的主要热带切花品种。目前，荷兰、夏威夷、毛里求斯是世界红掌的主要生产中心，而我国红掌产业虽然起步较晚，但近年来发展迅速。随着红掌生产规模的不断扩大以及人们对红掌的喜爱持续升温，红掌如今已成为了国内主要的盆栽花卉和切花；此外红掌还具有净化空气的作用，不仅可以吸收人体排出的废气(氨气、丙酮)，还可以吸收装修残留的各种有害气体如甲醛等，同时可以保持空气湿润，是室内盆栽的优选，因此红掌栽培有着广泛的应用前景和很高的经济价值。

红掌的繁殖方式有播种繁殖、扦插繁殖、分株繁殖以及组织培养这几种。播种繁殖法一般在育种中才使用，由于红掌自然授粉不良，需经人工授粉才能得到种子，而且播种苗需培育3-4年才能开花，难以满足市场推广的需求。扦插、分株以及组织培养均属于无性繁殖方法，前两者繁殖系数较低，很难满足规模化生产所需的种苗。常规的组织培养方法虽然能在较短的时间繁殖出大量红掌组培苗，但这些组培苗并未脱毒，在长期的无性繁殖中红掌体内会逐渐积累大量病毒，如芋花叶病毒(DsMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯y病毒组等，从而导致植株发生病毒病。病毒病对红掌的危害表现主要有：花叶萎缩扭曲，有坏死斑，植株矮化或黄化，肉穗状花序干枯，严重时整株枯死，这些危害严重影响了红掌的品质和产量，制约了我国红掌商品化的发展。因此，研究红掌的脱毒技术，生产无病毒种苗，成为红掌产业所面临的一个重要问题。

目前，生产上使用的脱毒方法主要有热处理法脱毒、茎尖组织培养脱毒、抗病毒化学药剂脱毒以及茎尖微嫁接脱毒等。这些方法虽然能普遍适用于各科植物，但也都有一定的不足之处：热处理法脱毒对处理的时间和温度有着很高的要求，随着处理时间的延长和温度的提高脱毒也效果越好，但与此同时植物的存活率就越低；茎尖组织培养脱毒和茎尖微嫁接脱毒的效果与茎尖大小密切相关，一般认为茎尖越小脱毒效果越好，但成活率也随之降低；重复切取茎尖也是获取无病毒苗、提高脱毒效果的一种手段，但此种方法所需时间较长，操作步骤繁琐，工作效率低；抗病毒化学药剂脱毒通常也需要与茎尖组织培养结合起来应用，单独使用不能达到很好的效果。当前红掌脱毒技术还处于起步阶段，关于红掌脱毒方面的研究很少，而且脱毒方法还不完善，在专利网上仅检索到授权公告号为CN104542276 B的中国专利，公开了一种红掌脱毒培养的方法，该方法虽然脱毒效率较高，但操作步骤繁琐，脱毒苗生产周期较长，不适用于红掌脱毒苗的商业生产。