[发明专利]一种毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法

说明书

本发明公开了一种毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法。该方法属于生物技术领域，解决了现有技术中纳豆激酶发酵过程中微生物细胞活性低、纳豆激酶代谢产量低和生产稳定性差以及无法适应不同人体需求的问题。本发明包括以下步骤：毫米波照射制备芽孢杆菌株、毫米波照射制备九种培养基以及发酵种子后进行发酵，发酵液进行干燥。本发明根据九种不同体质制备不同配方的毫米波照射发酵培养基，毫米波可以快速有效的作用于微生物体内细胞，可令培养基生物转化效率、纳豆激酶产量与活性均能得到明显提高，九种配方可以满足九种不同体质人群对营养健康需求，整个发酵过程在特定频率的毫米波环境下进行，利用毫米波的非热效应，提升丝氨酸酶的含量和活性。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体地说，尤其涉及一种毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法。

背景技术

血栓性疾病是中老年人群的高发病，是现今仅次于癌症的第二大病症，具有很高的死亡威胁，目前，溶解血栓是治疗这一类疾病的重要手段。纳豆激酶是一种枯草杆菌蛋白酶，是纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌产生的一种丝氨酸蛋白酶，具有溶解血栓、降低血粘度，改善血液循环，软化和增加血管弹性等作用。纳豆激酶通过刺激血管内皮细胞产生组织型纤溶酶原激活剂t-PA，t-PA将纤溶酶激活为纤溶酶，溶解纤维蛋白，直接溶解血栓；同时将人体内的尿激酶原激活为尿激酶，尿激酶与t-PA一同激活纤溶酶原，达到溶解血栓。但是，目前国内的纳豆激酶产品对应不同体质的人群，都是采用统一的生产配方，无法做到随人的体质变化而变化，导致纳豆激酶产品无法有效发挥营养保健作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种提高微生物细胞活性、提高纳豆激酶代谢产量和生产稳定性以及适应不同人体需求的九种体质配方的毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法。

为了实现上述技术目的，本发明毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法采用的技术方案为：

一种毫米波培养基制备九质纳豆激酶的方法，包括以下步骤：

(1)在封闭环境中，将不同品种的纳豆放置于不同锥形瓶中，并添加无菌水至30mL，双折射光子晶体光纤微波毫米波发生器通过毫米波波导管引出频率为53～60GHz的毫米波，波导管口持续对准纳豆，锥形瓶放入37℃摇床中振摇30min，取出后水浴沸煮5min，冷却后稀释涂布LB固体培养基，37℃培养过夜，挑取经培养后LB平板培养基上的单菌落点于酪蛋白初筛平板，37℃培养过夜，选取透明圈直径与菌落直径比大者转接至LB液体培养基中，得纳豆芽孢杆菌株；