[发明专利]肝用鹅肥肝重的辅助选择标记及利用分子标记辅助选择方法

权利要求书

1.一种肝用鹅肥肝重的辅助选择标记，具有 SNP位点，该位点位于在IGFBP5基因起始密码子上游第574 bp位，为574 G/A。

2.利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述方法为：选定待测的朗德鹅个体，抽取血液并提取DNA，利用引物对进行聚合酶链式反应PCR并检测产物，对PCR产物测序并判定基因型，依据基因型挑选多态性位点具有AA基因型个体都留着种用；

所述引物对为：

上游引物：5’- CTCAGGAGCTAAACCGTATTCAA-3’；

下游引物：5’- CCTCGTGCCCAAGGATGT -3’。

3.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述方法具体为：

1）选定待测的朗德鹅个体：从朗德鹅育种群体中挑选体重均匀的健康个体；

2）抽取血液并提取DNA：从检测个体的翅静脉中抽取血液；利用DNA提取试剂盒，提取DNA模板；

3）聚合酶链式反应及产物检测：利用提取的DNA作PCR中的模板和所述引物对进行PCR；取PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳；

4）测序并判定基因型：如呈现772 bp大小的单一条带，则对PCR产物和引物测序，依据测序结果确定基因型；

5）依据基因型挑选合格的个体，凡是在多态性位点具有AA基因型个体都留着种用。

4.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述所述PCR反应体系为20 μL，10µM 上游引物0.5 μL；10µM下游引物0.5 μL；2×Taq mix10 μL；水8 μL；200ng/μL DNA 1 μL。

5.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述所述PCR反应体系中的上述物质在按顺序加入反应管后在台式离心机上以1000转/分钟离心1分钟，使所加物质全部沉于底部，然后放置于PCR仪中进行PCR扩增。

6.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述所述PCR反应条件为：95 ºC预变性5分钟；95 ºC 30秒，58 ºC 30秒，72 ºC 1分钟，35个循环；72 ºC，5分钟；4 ºC，保持至电泳。

7.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述步骤1）从检测个体的翅静脉中抽取0.1 mL的血液。

8.根据权利要求2所述的利用分子标记辅助选择肝用鹅肥肝重性状的方法，其特征是，所述步骤2）取5 µL产物进行1.5%琼脂糖凝胶电泳。