[发明专利]pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒及其构建方法和应用

说明书

本发明为平衡水稻抗逆和发育的对立性面，提供一种pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒，所述pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒包括OsHEN1启动子和OsSPL14基因，所述OsSPL14基因连接于OsHEN1启动子下游，本发明还提供一种含有前述pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒的重组表达载体，并提供前述的重组表达载体的构建方法。本发明的基因表达盒和重组表达载体能够产生水稻优良产量性状如增加茎粗和提高单蘖产量和/或提高水稻对水稻白叶枯病菌PXO99A的抗性。当转基因株系在未受到PXO99A入侵时，微小增加转基因水稻中本底的OsSPL14的表达量，发挥OsSPL14调节水稻理想株型的特性，适当降低分蘖以提高有效分蘖数，增加茎粗抗倒伏和提高水稻单蘖产量。当转基因株系受到PXO99A入侵时，大幅度地提高下游OsSPL14基因的转录水平，能够特异的增强对白叶枯的抗病性。

技术领域

本发明涉及植物基因工程技术领域，具体指pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒的构建和育种应用。

背景技术

Xanthomonas oryzae pv.oryzae，Xoo是引起水稻白叶枯病的致病菌。水稻白叶枯病在我国各稻区均有发生，为水稻主要病害。高温下秧苗病斑短条状，小而狭，扩展后叶片很快枯黄凋萎，秕谷和碎米多，减产达20％-30％，重的可达50％-60％，甚至颗粒无收，对产量影响较大。因此极有必要通过基因工程提高水稻对白叶枯病抗性。

植物包括农作物大都固着在生长地，它们可以根据一直在变化的外界环境而改变内源生长发育的信号网络，从而更好地适应外界环境。当遭遇病原菌侵染时，植物会将能量从生长发育方面调节到防御信号网络上，因此抗病的过程往往表现为抑制生长发育。为了提高农作物的抗病性，实验室里的相关研究筛选了一批组成型激活抗性反应的突变体。这些突变体往往表现为细胞死亡，高表达抗病相关基因，抗性物质高累积，最终能有效地抑制细菌或者真菌的繁殖，但是这些突变体在生长发育方面大都有植株矮化，育性降低，种子产量下降等缺点。这些抗病基因的研究对于了解植物免疫分子通路有很大的贡献，但是因为以上提到的经常伴随的发育缺陷，妨碍了这些基因在遗传育种生产中的应用。

因此，在提高水稻对白叶枯病抗性研究中，需要平衡水稻抗逆和发育的对立性面。研究出一种既可以特异性增加水稻抗病性，又可以增加水稻产量的转基因材料具有重要且广阔的应用价值。

发明内容

本发明目的是为了针对现有技术的不足，提供一种既可以特异性增加水稻白叶枯病抗性，又可以增加水稻产量的基因表达盒及其构建方法和应用。

本发明的技术方案如下：

本发明的第一个目的是提供一种pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒，所述pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒包括OsHEN1启动子和OsSPL14基因，所述OsSPL14基因连接于OsHEN1启动子下游。

所述OsHEN1启动子核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，OsSPL14基因核苷酸序列如SEQ ID No.6所示。

本发明的第二个目的是提供一种含有前述pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒的重组表达载体。

进一步的，所述重组表达载体为将权利要求1所述的pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒插入到pCAMBIA1305.1质粒载体的EcoRI和HindIII位点之间得到。

前述的pOsHEN1::OsSPL14基因表达盒或前述的重组表达载体在改良水稻作物中的应用，所述改良包括：提高水稻优良产量性状和/或提高水稻对水稻白叶枯病菌PXO99A的抗性。

进一步的，水稻优良产量性状包括：降低分蘖以提高有效分蘖数减少生产消耗，和/或增加茎粗增强抗倒伏能力，和/或提高水稻单穗产量，以提高水稻产量

本发明的第三个目的是提供前述的重组表达载体的构建方法，所述构建方法包括如下步骤：