[发明专利]一种可调控释放的肉桂醛精油脂质体抗菌双层膜的制备方法

权利要求书

1.一种肉桂醛精油脂质体抗菌双层膜的制备方法，包括如下步骤：

(1)制备肉桂醛热敏型精油脂质体

将二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、肉桂醛精油按4g:1-2g:2g:1-2mL溶于三氯甲烷中，并采用超声辅助溶解后倒入反应容器中，通过旋转蒸发将溶剂蒸干，在反应容器内壁得到带蜂窝状的薄膜；往反应容器中加入0.05-0.1mmol/L的PBS缓冲溶液，经水合旋蒸得到水合溶液；所得水合溶液再经超声、离心、滤膜过膜处理，得到肉桂醛热敏型精油脂质体；

(2)制备热敏蛋白复合型脂质体

将酪蛋白溶解在含有吐温80表面活性剂的0.05-0.1mmol/L的PBS缓冲溶液中，所述PBS缓冲溶液中吐温80的浓度为10-15mg/mL，所述酪蛋白与PBS缓冲溶液的投料比为0.8-1.2g：1L，并在室温下温育3-4小时，得到含有酪蛋白的溶液；随后，将肉桂醛热敏型精油脂质体和含有酪蛋白的溶液按照体积比8-12:1-3混合，然后进行10-15分钟冰浴超声处理；

将酪蛋白和肉桂醛热敏型精油脂质体混合物在-20±2℃下冷冻2～3小时，此过程使囊泡破裂，然后在0±2℃下缓慢解冻2～3小时，酪蛋白会穿插在脂质体双分子层中，然后温和脉冲超声处理以促进蛋白脂质体的密封得到热敏蛋白复合型脂质体，超声功率设置为50-100W，超声时间为1.5-2小时；

(3)制备果胶流延膜

将果胶溶于去离子水中过夜溶解，加入甘油作为增塑剂，取果胶溶液于玻璃皿中，放入35-40℃烘箱中4±0.5小时后揭膜，得到果胶流延膜；其中，果胶和甘油的投料质量比为3-3.5:0.9-1.1；

(4)制备静电纺丝双层膜

静电纺丝液的配制：取玉米醇溶蛋白粉溶解于乙醇的体积浓度为70-80％的乙醇水溶液中，其中玉米醇溶蛋白粉与乙醇水溶液的投料比为2-3g：10mL，得到基础纺丝液；往基础纺丝液中加入热敏蛋白复合型脂质体，其中基础纺丝液与热敏蛋白复合型脂质体的体积比为5-10:3-5，搅拌2-3小时，超声除去气泡，得到静电纺丝液；

纺丝条件：取制备的静电纺丝液进行静电纺丝，纺丝参数为电压13-15KV，针头型号18G，极距针头到接收器的距离11-13cm，接收器为滚筒形式，将步骤(3)制备的果胶流延膜作为接收物，纺丝液推进速率0.15-0.18mL/h，温度控制在25±2℃，相对湿度为50±5％，得到肉桂醛精油脂质体抗菌双层膜，其厚度为0.6～0.8mm。

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷脂酰胆碱、胆固醇、肉桂醛精油的投料比为4g:2g:2g:2mL。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，旋转蒸发的条件为：在35-40℃、0.07-0.08MPa下减压旋蒸40-50min将溶剂蒸干。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，水合旋蒸的条件为：在室温、0.02-0.03MPa条件下水合旋蒸30-40分钟。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，水合旋蒸的条件为：在25-30℃、0.02MPa条件下水合旋蒸40分钟。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的水合溶液在封闭式探头超声仪中进行超声，超声条件为：400-450W超声10-15min。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，控制果胶、去离子水和甘油的投料质量比为3-3.5:100:0.9-1.1，取果胶溶液置于玻璃皿中，其中果胶溶液体积与玻璃器皿的底面积的比例为0.1-0.12mL/cm²，经烘干得到果胶流延膜。

8.如权利要求7所述的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，控制果胶、去离子水和甘油的投料质量比为3:100:0.9。