[发明专利]一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒有效
申请号: | 201811007934.2 | 申请日: | 2018-08-31 |
公开(公告)号: | CN108866243B | 公开(公告)日: | 2022-02-08 |
发明(设计)人: | 刘光亮;陈佳宁;黄鑫 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州兽医研究所 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851 |
代理公司: | 兰州振华专利代理有限责任公司 62102 | 代理人: | 张晋 |
地址: | 730046 *** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 种猪 肠道 冠状病毒 荧光 定量 pcr 检测 试剂盒 | ||
1.一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒内包括:
序列为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ IDNo.6、SEQ ID No.7、SEQ ID No.8的八条引物,及序列为SEQ ID No.9、SEQ ID No.10、SEQID No.11、SEQ ID No.12的四条探针。
2.根据权利要求1所述的一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于试剂盒内还有:A.六碱基随机引物;B.由预混的反转录缓冲液、dNTP、RNA酶抑制剂、反转录酶和DEPC水组成的反转录预混体系;C.由PCR缓冲液、dNTP、Taq酶、双蒸水组成的PCR扩增预混体系;D.不同浓度阳性cDNA对照;E. 阴性cDNA对照。
3.根据权利要求1所述的一种猪肠道冠状病毒4重荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于猪流行性腹泻病毒上游引物浓度为0.6 pmol/µL,下游引物浓度为0.6 pmol/µL,探针浓度为0.2 pmol/µL;猪传染性胃肠炎病毒上游引物浓度为0.4 pmol/µL,下游引物浓度为0.4pmol/µL,探针浓度为0.2 pmol/µL;猪δ冠状病毒上游引物浓度为0.4 pmol/µL,下游引物浓度为0.4 pmol/µL,探针浓度为0.4 pmol/µL;猪肠道α冠状病毒上游引物浓度为0.4 pmol/µL,下游引物浓度为0.4 pmol/µL,探针浓度为0.1 pmol/µL。
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