[发明专利]一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法

说明书

本发明属于水产养殖应用技术领域，具体公开了一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法，包括以下步骤，a、准备。b、取样。c、液体培养d、涂布。e、放置药敏贮药圈。f、结果判定。本发明的有益效果在于：1、通过对发病个体和水样进行药敏检测，在检测后观察药敏贮药圈，出现透明区的药敏纸片中的药物均可作为备选药物，透明区较大的药敏纸片中的药物可作为优选药物，选出最合适的抗生素，避免了滥用渔药，特别是滥用抗生素的现象，防止水产品药残；2、最快仅需要12个小时即可完成，当天即可进行选药和相应的预防与治疗，适用于水产养殖基层作为防治细菌性疾病的选药工作，并且对保护水产品养殖的生态环境起到积极作用。

技术领域

本发明属于水产养殖应用技术领域，具体涉及一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法。

背景技术

由于养殖密度过大、环境恶化和其它多种原因，导致近年来水产养殖细菌性疾病频发，造成巨大的经济损失。由于养殖者科学知识的缺乏和市场经济利益的驱使，滥用渔药特别是抗生素的现象普遍存在，导致水产致病菌的耐药性、水产品药残、环境污染及生态破坏等问题日益加剧。要从源头上解决抗生素滥用问题，关键是在治疗前进行药敏试验，从而在正确诊断的基础上对症下药。国际上常用的药敏试验方法是K-B纸片法，采用这种方法进行药敏试验要求将致病菌分离纯化，需要花一周左右的时间，而且必须在专业的微生物实验室条件下，由具备专业知识的人员完成，因此不适合在广大养殖者中推广。

中国专利局于2007年2月28日公开的，授权公告号为“CN2874498Y”的“药敏检测盒”，它用于动物疫病诊断检测，包括带检测孔１的检测盒２上盖有检测盒盖３，在检测盒２底面上刻有测量刻度４。它通过各种药物，直接按照试验目的加入检测孔中即可进行药敏试验，这种检测盒由于病毒、细菌没有培养，所获取的病毒、细菌有限，根本无法进行有效的检测。

基于上述问题，本发明提供一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法。

发明内容

发明目的：本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法，其操作简便，价格适中，适用于水产基层实现高效、精准的选药工作（防治淡水/海水细菌性疾病中）。

技术方案：本发明的一方面提供一种应用于水产养殖药敏试剂盒的药敏检测方法，包括以下步骤，a、准备：将手、剪刀和解剖容器清洗干净，并用75%医用酒精、水煮或火烧等形式对剪刀和解剖容器进行消毒。b、取样：选病症典型的濒死鱼虾等个体，清水洗净解剖部位；用剪刀解剖，观察病变，再次消毒剪刀后，剪取约黄豆大小的典型病灶直接放入装有增菌培养液的离心管，并旋紧离心管管盖，若检测水样，则直接取5-10滴水样滴入装有增菌培养液的离心管内，并旋紧离心管管盖。c、液体培养：用力振荡离心管数次后放置，且应避免阳光直射，之后每隔半个小时至1个小时用力振荡离心管数次，直到液体混浊。d、涂布：将离心管内液体倒入装有固体培养基的培养皿中心部位，应避免倒入离心管底的沉淀物，然后用涂布棒轻轻地在固体培养基上将液体涂抹均匀，并应避免将固体培养基表面划破。e、放置药敏贮药圈：将培养皿敞盖平放晾干，至表面基本干燥，然后取出药敏贮药圈，将药敏纸片朝下放入培养皿中，轻压，使纸片与培养基表面充分接触，盖上培养皿的盖子后倒扣，静置于温度在20度以上的地方8-15小时。f、结果判定：1）、出现透明区的药敏纸片中的药物均可作为备选药物，透明区较大的药敏纸片中的药物可作为优选药物，综合考虑本类病害的常用药种类、用药史、药价、给药方式、进出口规定的因素，选出最合适的抗生素；2）、如未长出细菌或细菌呈斑点状散布，则表明病害可能不是由细菌感染引起；3）、如细菌已布满整个培养盒，但未出现透明区，则表明在药敏贮药圈上的所有药敏纸片中的药物在标准使用剂量时对致病菌无效，建议其他产品重新进行选药。