[发明专利]六出花生殖芽顶端组织的微繁方法

说明书

本发明公开了一种六出花生殖芽顶端组织的微繁方法，包括步骤：(1)在4月份采集六出花的根茎芽或生殖芽，或在7月份采集营养芽，并取芽顶端分生组织作为外植体，且将外植体修成2‑4cm长待用。(2)将外植体清洗、消毒。(3)置于初代培养基上进行初代培养，得到发芽的外植体。(4)在继代培养基上继代培养4代，得到生根后的组织苗。(5)炼苗，得到六出花苗木。本发明采用组培方法，可以避免种子繁殖出现变异的现象，可以对六出花优良品种进行大量繁殖，使六出花组培繁殖更为丰富，能够满足市场需要。

技术领域

本发明涉及农林技术领域，尤其涉及六出花苗木的组织培养方法。

背景技术

六出花(Alstroemeria aurantiaca D.Don)也叫智利百合、秘鲁百合等，是石蒜科、六出花属多年生草本，国外有的国家归在百合科下。其花色丰富、花朵艳丽、品种繁多，是盆栽、切花、花坛栽培的上佳品种。繁殖常用种子、分株繁殖，但对优良品种的繁殖则常用分株繁殖。

分株繁殖虽然是常用方法，但对六出花优良品种的繁殖来说，是除组培外唯一的一种方法了(种子繁殖由于后代易发生变异，一般情况下用于新品种选育，良种扩繁时不适用)，并且运用组培方法进行繁殖在国内外均不成熟。而分株法对六出花的扩繁来说相当缓慢，满足不了市场需求。六出花在荷兰有很多品种，但购入必须要交一大笔品种权费用，所以无法大面积繁殖。

在组织培养技术中，采用生殖芽培养进行大规模繁殖供给市场是可能的，但相对于其它很多科属植物来说，石蒜科植物的繁殖是很困难的，国内在生产上组培也没有先例。

在组织培养中，采用六出花根茎上长出的茎顶组织进行培养，遭受杂菌污染比较严重，把根茎挖出后，从根上的切痕带来的病菌污染、母株的生长势低下所带来的生育障碍等等原因，使得采用根茎以外的组织进行大量繁殖成为可能。

有学者采用生殖芽顶端组织对六出花的组织培养繁殖进行研究，其它组培方式基本没有。

发明内容

发明目的：本发明提供了一种六出花生殖芽顶端组织的微繁方法，该方法解决了现有的六出花常用种子、分株繁殖方法无法大面积繁殖的问题；同时，满足了市场需求。

技术方案：本发明的六出花生殖芽顶端组织的微繁方法，包括以下步骤：

(1)在4月份采集六出花的根茎芽或生殖芽，或在7月份采集营养芽，并取芽顶端分生组织作为外植体，且将外植体修成2-4cm长待用，优选3cm。

(2)将外植体清洗、消毒。

(3)在无菌条件下，将带有1-2个叶原基的顶端分生组织置于初代培养基上，在22-27℃、每天16h 3000lux光照条件下进行初代培养，6周后外植体基部发芽，得到发芽的外植体，温度优选25℃。

(4)对发芽的外植体进行切割修成2-4cm，优选3cm置于继代培养基上，继代培养4代，得到生根后的组织苗。

(5)将生根后的组培苗洗净、杀菌，栽植于泥炭土中，之后6周内保湿、遮光，得到六出花苗木。

其中，步骤(2)中，所述清洗采用洗衣粉溶液；所述消毒采用0.5％次氯酸钠浸泡。

步骤(3)中，所述初代培养基采用MS，并添加蔗糖0.3％。

所述初代培养基还添加激素6-BA和NAA，浓度在0-10mg/L。

步骤(4)中，所述继代培养基采用MS，且MS培养基中的N素浓度为 25-100％，添加蔗糖3-12％，并添加激素6-BA和NAA，浓度在0-10mg/L。

步骤(5)中，所述洗净采用水下12h洗净；所述杀菌采用多菌灵2000倍杀菌，并每2周喷1次。

具体步骤如下：

(1)材料采集