[发明专利]一种从牛粪中提取酪氨酸及其检测方法

说明书

本发明公开了一种从牛粪中提取酪氨酸及其检测方法，涉及氨基酸提取技术领域。本发明检测方法包括：步骤一：水解提取样液；步骤二：预处理样液；步骤三：配置缓冲液；步骤四：检测比对确定结果；提取酪氨酸方法包括：步骤一：溶解提取；步骤二：过滤提纯；步骤三：浓缩结晶；步骤四：酪氨酸提纯。本发明通过对牛粪进行溶解、过滤、浓缩和提纯，得到纯度较高的酪氨酸晶体；解决了现有制备时间较长，技术难度大和纯度低的问题；同时通过利用溶解，浓缩和结晶的方法，简化了制备过程，利于工业化生产。

技术领域

本发明属于氨基酸提取技术领域，特别是涉及一种从牛粪中提取酪氨酸及其检测方法。

背景技术

获得酪氨酸的方法也有三种：蛋白质水解法、化学催化法和微生物发酵法；现在工业生产酪氨酸使用较多的是微生物发酵法，但是微生物的复杂性以及对环境的敏感性导致了酪氨酸生产的技术难度；现有关于从牛粪中提取、分离酪氨酸的相关方法较少；且制备过程较为复杂，制备产物中杂质较多，需要多步提纯制备时间较长，增加了生产成本；使用与工业生产。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从牛粪中提取酪氨酸及其检测方法，通过对牛粪进行溶解、过滤、浓缩和提纯，得到纯度较高的酪氨酸晶体；解决了现有制备时间较长，技术难度大和纯度低的问题；同时通过利用溶解，浓缩和结晶的方法，简化了制备过程，利于工业化生产。

为解决上述技术问题，本发明是通过以下技术方案实现的：

本发明为一种从牛粪中检测酪氨酸的方法，包括以下步骤：

步骤一：水解提取样液；取牛粪用去离子水水解，在3000-5000r/min转速下离心3-5分钟，分离提取上清液；

步骤二：预处理样液；取步骤一中的上清液加入至氢氧化钠溶液中，稀释至4-5×10-3mol/L；

步骤三：配置缓冲液；配置90mmol/L的磷酸盐溶液和8mmol/L的β-环糊精，混合后控制PH值为6-7之间；

步骤四：运行步骤三配置的缓冲液使用毛细管电泳法对步骤二中预处理后的样液进行检测，根据标准样品谱图比对确定结果。

进一步地，所述步骤二中氢氧化钠浓度为0.1-0.2mol/L。

进一步地，所述步骤三中磷酸盐为磷酸二氢盐。

一种从牛粪中提取酪氨酸的制备方法，包括以下步骤：

步骤一：溶解提取；取鲜牛粪加入醇水混合溶液中，搅拌溶解后，离心处理分离提取上清液；

步骤二：过滤提纯；将步骤一中提取的上清液使用纳滤膜进行过滤，重复两次收集合并滤液；

步骤三：浓缩结晶；将步骤二所得滤液进行恒温50-70摄氏度下水浴蒸馏浓缩，冷却至室温后加入氨水调节PH值为5-6，搅拌析出晶体，过滤干燥；

步骤四：酪氨酸提纯；将步骤三中得到的晶体加入溶于醇水溶液和盐酸溶液中，使用氨水调节PH值为5-6之间，冷却至2-8摄氏度，搅拌析出晶体，过滤后使用去离子水冲洗晶体，干燥后得酪氨酸晶体。

进一步地，所述步骤一中鲜牛粪与醇水混合溶液的质量比为1:10-25；所述醇水混合溶液的体积溶度为30-60％。

进一步地，所述步骤四中去离子水温度为3-10摄氏度。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明通过两次结晶处理，提高了制备的酪氨酸纯度。

2、本发明在制备过程中不涉及和使用有毒性的有机溶剂，提高了制备环境和制备过程的安全性，同时减少了产生的废液对环境的危害。

3、本发明通过对牛粪进行回收利用，提高了废物利用率，节约了能耗。