[发明专利]一种生物填料上生物膜的培养方法

权利要求书

1.一种生物填料上生物膜的培养方法，其特征在于，该培养方法包括如下步骤：

取活性污泥振荡2~3h，静置4~5天，取上清液按1~3%的接种量接种至富集培养基中，于25~30℃、120r/min培养2~3天，离心，取上清液重复富集培养3~5次，得富集培养液，取质量分数为5%的苯酚水溶液按质量比1：1000加入筛选培养基，得一级培养基，取富集培养液按3~5%的接种量接种至一级培养基，于25~30℃、120r/min、避光培养1~3天，得一级培养物，取质量分数为5%的苯酚水溶液按质量比1：500加入筛选培养基，得二级培养基，取一级培养物按3~5%的接种量接种至二级培养基，于25~30℃、120r/min、避光培养1~3天，得二级培养物；

加入质量分数为5%的苯酚水溶液的量按1g/L的梯度浓度增加，依次加入筛选培养基中，按相同的接种量接种，于25~30℃、120r/min、避光培养1~3天，再进行培养3~4轮驯化，得最终驯化菌液，取最终驯化菌液涂布于固体筛选培养基，于28~33℃培养18~24h，挑取菌径最大的菌落划线接种至固体筛选培养基中，培养18~24h，重复划线培养2~3次，得纯化菌落，取纯化菌落按3~7%的接种量接种至富集培养基中，于25~30℃、120r/min、培养2~4天，离心，取沉淀，冷冻干燥，得干燥物；

取干燥物按质量比50~60：1~5加入光催化剂混合，得接种基体物，取接种基体物按10~15%的接种量接种至生物填料中，于室温下进行微气泡曝气充氧2~3天，过废水处理反应器，控制溶解氧，反应器进水中含有活性营养物质，每天早晚换水，培养8~10天，得到生物膜，即实现生物膜的培养。

2.根据权利要求1所述的生物填料上生物膜的培养方法，其特征在于，所述步骤（1）中筛选培养基为：按质量份数计，0.3~0.7份磷酸氢二钾、0.4~0.6份磷酸二氢钾、0.2~0.4份氯化钠、1~3份硝酸铵、0.1~0.3份硫酸镁、0.001~0.003份氯化钙、0.001~0.003份六水合氯化铁、1000份水，121℃灭菌20min；富集培养基为：按质量份数计，取4~7份牛肉膏、8~10份葡萄糖、1~3份蛋白胨、3~5份氯化钠、0.8~1.5份氯化铵、1000份水，121℃灭菌20min。

3.根据权利要求1所述的生物填料上生物膜的培养方法，其特征在于，所述步骤（3）中生物填料的制备方法为：按质量份数计，取100~150份PP、50~60份二氧化钛粉末、4~6份聚乙二醇、15~20份硬脂酸、8~10份γ-脲基丙基三乙氧基硅烷、2~5份白矿油、1~3份石蜡、7~15份活性炭、3~8份钡铁氧体、4~7份锶铁氧体、1~3份氢氧化钠、2~4份葡萄糖酸钠混合，于160~180℃混炼1~2min，升温至170~190℃注塑成型，得生物填料基体物，置于充磁机中磁化12~20min，即得生物填料。

4.根据权利要求1所述的生物填料上生物膜的培养方法，其特征在于，所述步骤（3）中光催化剂：取硝酸铝按质量比1：8~12加入蒸馏水，搅拌混合1~2h，得液体a，取硝酸铒按质量比1：2~4：10~15加入硝酸钇、蒸馏水，搅拌混合30~40min，得液体b，取液体a按质量比1~3：2~5加入液体b，再加入液体a质量8~10倍的柠檬酸，于80~85℃搅拌混合2~3h，干燥，研磨粉碎过100目筛，收集过筛颗粒，于1100~1200℃保温1~2h，冷却至室温，即得光催化剂。

5.根据权利要求1所述的生物填料上生物膜的培养方法，其特征在于，所述步骤（3）中活性营养物质为：按质量份数计，取0.3~0.6份漆酶、8~12份羟基磷灰石、1~3份微量元素营养盐、0.01~0.04份赤霉素溶液、0.3~0.8份黄腐酸、2~5份氯化铵、6~9份海藻糖、0.05~0.15份磷酸二氢钠混合，即得活性营养物质。