[发明专利]一种降血糖七肽

说明书

本发明公开了一种降血糖七肽，所述降血糖七肽的氨基酸序列如下所示：Gly‑Val‑Pro‑Met‑Pro‑Asn‑Lys，缩写为GVPMPNK，分子量741.90Da，纯度为96.1%。本发明的多肽使用多肽合成仪，采用固相合成法合成。体外α‑淀粉酶和α‑葡萄糖苷酶的抑制活性检测表明，对2种酶都有良好抑制作用，对α‑淀粉酶的50%抑制浓度（IC50）为236.23μg/mL，对α‑葡萄糖苷酶的50%抑制浓度（IC50）为151.46μg/mL。本发明提供一种降血糖七肽，可应用于生物制药领域。

技术领域

本发明属于生物制药领域，具体涉及一种合成多肽及其应用。

背景技术

糖尿病是一种慢性病，是由于体内胰岛素不足引起的蛋白质、脂肪、碳水化合物代谢紊乱，主要特点是慢性高血糖。研究发现有许多天然的抗糖尿病有效成分，譬如：银杏叶提取物、植物多糖等。生物活性多肽的降血糖方面的研究较少。已有的一些研究表明，生物活性肽能有效改善糖尿病的作用。例如，在王军波等的研究中，海洋胶原肽能够缓解高胰岛素血症大鼠的胰岛β细胞的结构损伤，增加颗粒的分泌，减少脂滴的形成，显著提高胰岛素的生物学活性；显著降低的空腹胰岛素水平，对空腹血糖和口服葡萄糖耐量也有一定的改善作用。在黄凤杰等的研究中，鲨鱼肝活性肽S-8300有抗氧化作用，通过清除自由基保护胰岛β细胞，调节糖脂代谢，延缓胰岛β细胞的衰竭，在一定程度上能够治疗糖尿病。

人体中淀粉等糖类物质的消化吸收，需要依赖α-葡萄糖苷酶与α-淀粉酶这两种关键酶。因此，抑制这两种关键酶的活性便能减缓碳水化合物降解为单糖的速度，以达到调控餐后血糖升高过快的目的。

发明内容

本发明选取α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶为研究对象，测定合成肽的体外抑制活性。本发明的目的是提供一种具有体外降血糖活性的合成多肽，可应用于生物制药领域。

本发明所述的合成多肽缩写为GVPMPNK，分子量741.9Da，纯度为96.1％，序列为：Gly-Val-Pro-Met-Pro-Asn-Lys。其中，

Gly表示英文名称为Glycine，中文名称为甘氨酸的氨基酸的相应残基；

Val表示英文名称为Valine，中文名称为颉氨酸的氨基酸的相应残基；

Pro表示英文名称为Proline，中文名称为脯氨酸的氨基酸的相应残基；

Met表示英文名称为Methionine，中文名称为甲硫氨酸的氨基酸的相应残基；

Pro表示英文名称为Proline，中文名称为脯氨酸的氨基酸的相应残基；

Asn表示英文名称为Asparagine，中文名称为天冬酰胺的氨基酸的相应残基；

Lys表示英文名称为Lysine，中文名称为赖氨酸的氨基酸的相应残基。

本发明所述的氨基酸序列采用标准Fmoc方案，通过树脂的筛选，合理的多肽合成方法。将目标多肽的C-端羧基以共价键形式与一个不溶性的高分子树脂相连，然后以这个氨基酸的氨基作为起点，与另一分子氨基酸的羧基作用形成肽键。不断重复这一过程，即可以得到目标多肽产物。合成反应完成后，去除保护基，将肽链与树脂分离，即得到目标产物。多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程，固相合成顺序从C端向N端合成。

本发明通过研究合成肽对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制作用来评价其降血糖作用。

进一步地，所述七肽GVPMPNK对α-淀粉酶有抑制活性，IC50值为236.23μg/mL。

进一步地，所述七肽对α-葡萄糖苷酶的50％抑制浓度(IC50)为151.46μg/mL。

进一步地，所述七肽在2.5-5mg/mL浓度范围内，对α-淀粉酶抑制率是78％-83％。