[发明专利]一种黄州萝卜开放式组织培养方法

说明书

本发明公开了一种黄州萝卜开放式组织培养方法，属于植物组织培养技术领域。本发明黄州萝卜开放式组织培养方法包括以下步骤：将培养基配制好后分装到经过消毒的培养容器中，冷却凝固后接种黄州萝卜试管苗在开放环境下进行培养；所用到的培养基，按1L培养基体积计，在MS培养基的基础上再加入蔗糖25g、琼脂粉7g、6‑BA 2mg、NAA 0.02mg、次氯酸钠500‑2000mg，该培养基的配制无需高温高压灭菌。本发明与需要高温高压灭菌的传统组织培养技术相比，两者试管苗生长速度和平均污染率无显著差异。本发明无需严格的无菌环境，可以较大幅度降低黄州萝卜组织培养的成本，有利于推动大别山区地理标志产品黄州萝卜产业的发展。

技术领域

本发明涉及组织培养农林生物技术领域中的植物组织培养技术，具体涉及一种无需高温高压灭菌的黄州萝卜开放式组织培养方法。

背景技术

黄州萝卜是湖北省黄冈市大别山区的地方特色蔬菜品种，自东汉以来就有历史记载，栽培历史悠久。2008年9月19日，中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局第103号公告批准黄州萝卜为地理标志产品。黄州萝卜生食甜脆可口，熟食味佳回锅而不烂，肉质根可溶性糖≥4.0％，维生素C≥30mg/100g，粗纤维素≤12g/kg，赖氨酸含量为一般白萝卜的0.25倍。然而，黄州萝卜在育种和栽培过程中很容易受到其它萝卜品种甚至其它十字花科植物花粉影响，因非人为控制杂交而导致种性退化，产量和品质大幅下降。为解决种性退化问题，自1985年开始至今，研究人员致力于黄州萝卜品种的改良和提纯复壮等育种工作。

申请人在黄州萝卜育种以及育苗过程中，为了快速扩大繁殖优良品种、保持品种优良特性，采用了组织培养技术。但传统的组织培养在无菌环境下进行，其缺点为培养基污染难以彻底解决、成本过高、规模化技术不成熟和技术繁琐。开放式组织培养技术无需高温高压灭菌，可以脱离严格无菌的操作环境，所以能克服传统组织培养技术的上述缺点，简化组培环节，降低组培成本。

发明内容

为了简化黄州萝卜组培环节、降低组培成本，本发明的目的在于提供一种用于黄州萝卜的开放组织培养基，以及一种低成本、易操作的黄州萝卜开放式组织培养方法。

本发明的目的通过下述技术方案实现：

一种用于黄州萝卜的开放组织培养基，按1L培养基体积计，在MS培养基的基础上再加入蔗糖25g、琼脂粉7g、6-BA 2mg、NAA 0.02mg、次氯酸钠500-2000mg(即次氯酸钠浓度为0.005-0.02％)。即每1L所述开放组织培养基中含有蔗糖25g、琼脂粉7g、KNO₃ 1900mg、NH₄NO₃ 1650mg、MgSO₄·7H₂O 370mg、KH₂PO₄ 170mg、CaCl₂·2H₂O 440mg、MnSO₄·4H₂O22.3mg、ZnSO₄·7H₂O 8.6mg、H₃BO₃ 6.2mg、KI 0.83mg、Na₂MoO₄·2H₂O 0.25mg、CuSO₄·5H₂O0.025mg、CoCl₂·6H₂O 0.025mg、Na₂·EDTA·2H₂O 37.3mg、FeSO₄·7H₂O 27.8mg、甘氨酸2.0mg、盐酸吡哆醇V_B6 0.5mg、盐酸硫铵素V_B1 0.1mg、烟酸0.5mg、肌醇100mg、6-BA 2mg、NAA0.02mg、次氯酸钠500-2000mg，pH 5.9。进一步优选的，每1L所述开放组织培养基中含有次氯酸钠1000mg。