[发明专利]一种预测甘薯育苗期病毒病显症率和严重度的方法有效
| 申请号： | 201811019008.7 | 申请日： | 2018-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN108950089B | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 张振臣;赵付枚;王爽;田雨婷;乔奇;秦艳红;王永江;张德胜 | 申请（专利权）人： | 河南省农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/686 |
| 代理公司： | 41122 郑州市华翔专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 张爱军;徐文婷 |
| 地址： | 450002 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甘薯 种薯 预测 病毒病 育苗期 甘薯病毒病 育苗 预警 病毒 育苗期病害 种薯贮藏期 甘薯品种 经济损失 实际结果 随机抽取 田间试验 重要意义 携带 总DNA 总RNA 毒率 种苗 验证 检测 经营 | ||
1.一种预测甘薯育苗期病毒病显症率和严重度的方法，其特征在于，在甘薯育苗前，随机抽取甘薯种薯样品，提取种薯样品的总DNA和总RNA，并分别采用PCR和RT-PCR方法检测种薯携带的病毒情况，根据种薯携带的病毒种类和种薯的带毒率，预测甘薯育苗期病毒病的显症率和严重度；
所述病毒包括SPFMV、SPVC、SPVG、SPLV、SPV2、CMV、SPCSV和Sweepoviruses；
预测甘薯育苗期病毒病显症率的计算公式为：
预测的病毒病显症率％＝检测的种薯样品带毒率×带毒种薯病毒病的显症概率；
其中，带毒种薯病毒病的显症概率为0.797；
甘薯育苗期病毒病的严重度为甘薯育苗期中重度显症情况，预测的病毒病中重度显症率％＝检测的种薯样品SPCSV与Potyvirus复合病毒带毒率；
所述的在甘薯育苗前，随机抽取甘薯种薯检测样品的重量比为8-15％。
2.根据权利要求1所述的预测甘薯育苗期病毒病显症率和严重度的方法，其特征在于，PCR和RT-PCR方法检测所用的特异性引物如下：
3.根据权利要求1所述的预测甘薯育苗期病毒病显症率和严重度的方法，其特征在于，PCR的反应体系为：2×Premix Ex Taq 10.0μL、5pmol/L正向引物和反向引物各2.0μL、100-400ng/μL DNA模板1.5μL，RNase-Free水补足至20.0μL。
4.根据权利要求1所述的预测甘薯育苗期病毒病显症率和严重度的方法，其特征在于，PCR的反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，53-57℃退火30s，72℃延伸50s，35个循环；72℃延伸7min。
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