[发明专利]将人源脂肪干细胞分化成胰岛β细胞的方法

权利要求书

1.一种诱导培养基，其特征在于，包括第一培养基、第二培养基和第三培养基，所述第一培养基包含17.5mM-23mM的葡萄糖，10ng/ml-20ng/ml的表皮生长因子，10ng/ml-20ng/ml的碱性成纤维生长因子，所述第二培养基包含10mM-20mM的尼克酰胺，4nM-8nM的激活素A，10nM-20nM的胰高血糖素，10nM-20nM延伸素4，100PM-150PM的肝细胞生长因子，20mM-25mM的葡萄糖，2％-3％的B27细胞培养添加剂，2％-3％的N2细胞培养添加剂，10％-20％的牛血清，所述第三培养基包含10mM-20mM的尼克酰胺，4nM-8nM的激活素A，10nM-20nM的胰高血糖素，10nM-20nM延伸素4，100PM-150PM的肝细胞生长因子，3.5mM-5.5mM的葡萄糖，2％-3％的B27细胞培养添加剂，2％-3％的N2细胞培养添加剂，10％-20％的牛血清，上述的百分数均为体积百分数。

2.将人源脂肪干细胞分化成胰岛β细胞的方法，其特征在于，采用权利要求1所述的诱导培养基诱导人源脂肪干细胞分化为胰岛β细胞。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，包括

分离、培养人源脂肪干细胞：

在包含17.5mM-23mM的葡萄糖，10ng/ml-20ng/ml的表皮生长因子，10ng/ml-20ng/ml的碱性成纤维生长因子的第一培养基中诱导培养2天；

在包含10mM-20mM的尼克酰胺，4nM-8nM的激活素A，10nM-20nM的胰高血糖素，10nM-20nM延伸素4，100PM-150PM的肝细胞生长因子，20mM-25mM的葡萄糖，2％-3％的B27细胞培养添加剂，2％-3％的N2细胞培养添加剂，10％-20％的牛血清的第二培养基中诱导培养3天；

在包含10mM-20mM的尼克酰胺，4nM-8nM的激活素A，10nM-20nM的胰高血糖素，10nM-20nM延伸素4，100PM-150PM的肝细胞生长因子，3.5mM-5.5mM的葡萄糖，2％-3％的B27细胞培养添加剂，2％-3％的N2细胞培养添加剂，10％-20％的牛血清的第三培养基中诱导培养2天。