[发明专利]IGF1基因启动子区的(CA)n

说明书

本发明公开一种IGF1基因启动子区的(CA)_n微卫星位点的应用，属于细胞工程和基因工程技术领域。本发明以IGF1基因为研究对象，将不同基因型的(CA)_n、Poly T和(CA)_n‑T_n分别与长白猪的生长性状进行关联分析，最后获得对长白猪生长性状促进作用最大的基因型。本发明设计周详，结果可靠。为证实Poly T位点和(CA)_n微卫星位点与长白猪生长性状之间的联系，本发明从多层次、多角度验证，在转录活性水平、细胞水平上进行验证，最后在个体中验证。本发明通过找到IGF1基因启动子区多态性位点(CA)_n和Poly T对长白猪生长的促进作用的应用，对于研究IGF1基因对猪生长的影响具有重要应用价值。

技术领域

本发明属于细胞工程和基因工程技术领域，具体涉及一种IGF1基因启动子区的(CA)_n微卫星位点在影响猪生长性状中的应用。

背景技术

胰岛素样生长因子1(Insulin-like growth factor 1，IGF1)又称生长介素C，是胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors，IGFs)系统的成员之一。IGF1 在动物生长过程中发挥着重要作用，它能够介导生长激素(growth hormone，GH) 发挥促生长作用，也能够调节哺乳动物卵巢颗粒细胞的增殖与分化等。

动物体内大部分的IGF1来自肝脏。血液中的GH被肝脏细胞表面的受体识别并结合，从而使肝脏细胞分泌IGF1，IGF1与血液中的IGF结合蛋白结合，并随血液运送到各靶细胞中起作用。除内分泌外，IGF1也可以通过旁分泌和/ 或自分泌的形式释放，并作用于靶细胞。研究发现，哺乳动物几乎所有组织均能分泌IGF1，如此广泛分泌的IGF1功能也很多，它既能调节机体代谢，促进细胞增殖、分化，也能调节机体的生殖和免疫，也能抗衰老、营养神经等。

研究表明，IGF1是机体内细胞增殖、分化和代谢的主要调节剂。因此IGF1 最主要的作用是促生长作用，而促生长作用主要表现为促进细胞的增殖与分化，调节细胞有丝分裂过程等。IGF1的促生长作用主要是通过激活RNA聚合酶，促进RNA和DNA的合成，从而促进细胞的增殖和分化。

以前的研究发现猪的IGF1基因存在丰富的多态性，而且它们与猪的多个经济性状相关。学者在探索家兔IGF1基因的多态性时发现，在家兔IGF1基因的第三外显子上检测到了T365C位点存在着三种基因型，分别为TT、TC和CC，与家兔生长性状进行关联分析发现，IGF1可能是影响家兔生长性状的主效基因或与主效基因连锁。研究表明皖南黄兔IGF1基因内含子1中存在三个多态性位点，即3056GA、3107TC和3164GA，且这三个位点均处于顺式作用元件位置，表明它们有可能会影响IGF1基因的转录表达。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种IGF1基因启动子区的(CA)_n微卫星位点在影响猪生长性状中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种IGF1基因启动子区的(CA)_n微卫星位点 -Poly T位点((CA)_n-T_n)的应用。

在IGF1基因靠近转录起始位点的上游区域发现了两个多态性位点，分别是 PolyT位点和(CA)_n微卫星位点，因此推测这两个多态性位点可能对IGF1基因的转录产生影响。

通过SSR荧光标记检测技术对(CA)_n微卫星位点和Poly T位点进行基因分型；进而构建(CA)_n-T_n不同单倍型双荧光素酶报告载体，探究不同(CA)_n-T_n单倍型对IGF1基因转录活性的影响；最后将两个多态性位点与长白猪的生长性状进行关联分析。