[发明专利]含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂及其制备方法

说明书

本发明公开了一种含有Aterreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂及其制备方法，抗肿瘤制剂的有效成分为A.terreus次级代谢产物，其制备方法为：向真菌培养基中添加表观遗传修饰调控剂TSA、烟酰胺、二胜肽，发酵培养，分别萃取发酵液、菌丝体，发酵浓缩物经柱色谱、高效液相色谱分离纯化，得Aterreus次级代谢产物。有益效果为：本发明在培养基中添加烟酰胺、二胜肽，与表观遗传修饰调控剂TSA产生协同增益作用，对Aterreus进行表观遗传修饰，并分离得到目标次级代谢产物；本发明制得的含有Aterreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂可用于治疗肺癌、乳腺癌、白血病等癌症，具有较好的抗肿瘤效果。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，尤其是涉及含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂及其制备方法。

背景技术

众所周知，微生物早已成为抗生素、酶抑制剂等活性物质的重要来源。微生物由于可以大规模发酵培养，无原料限制，不会破坏环境等优点已成为天然产物研究领域的热点。近年来从陆地微生物中获得新化合物的概率大幅降低，而海洋来源微生物由于其生存环境特异，除可产生与陆地相似的代谢产物之外，有时还会产生一些结构特异的新化合物，进而表现出良好的生物活性如：抑菌活性、抗病毒活性、蛋白激酶抑制活性、细胞毒活性、肿瘤细胞周期抑制活性等。海洋来源微生物具有巨大的开发利用前景。

曲霉属真菌一直以来都是天然产物界研究的重要菌种其次级代谢产物结构新颖骨架多变，除了常规的甾体，倍半萜，蒽醌等常见结构类型以外，往往还含有：生物碱类，肽类、聚酮类、二倍半萜等多种的骨架。这些结构新颖的化合物往往还含有细胞毒，抗菌，抗病毒等多种活性，成为海洋药物先导化合物的重要来源之一，引起了业内学者的广泛关注。

现有技术如授权公告号为CN 104710396 B的中国发明专利，公开了一种柳珊湖来源真菌次级代谢产物衍生物及其作为抗菌剂的应用。其分离得到的化合物对甲氧西林耐药的金黄色葡球菌(MRSA)、万古霉素耐药的肠球菌(VRE)具有较强的抑制作用，对革兰氏阴性菌有一定的抑制作用，最小抑制浓度MIC均小于12.5μM，表明其可发展为有潜力的抗菌药物，但该柳珊湖来源真菌次级代谢产物衍生物没有显示出抗肿瘤活性。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂。

本发明的目的之二在于提供一种由表观遗传修饰调控剂TSA修饰的，次级代谢产物多，发酵物萃取率高的含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂的制备方法。

本发明针对上述技术中提到的问题，采取的技术方案为：

含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂的制备方法，包括菌株发酵、次级代谢产物萃取、分离纯化和抗肿瘤制剂制备，所用A.terreus次级代谢产物的化学结构式为：

含有A.terreus次级代谢产物的抗肿瘤制剂的制备方法，包括菌株发酵、次级代谢产物萃取、分离纯化和抗肿瘤制剂制备，具体步骤为：

菌株发酵：向真菌培养基中添加表观遗传修饰调控剂TSA、烟酰胺、二胜肽，搅拌均匀，静置，发酵培养30天，一共发酵60L；烟酰胺、二胜肽添加到真菌培养基中，可与表观遗传修饰调控剂TSA协同作用，改变培养基内营养环境，提高培养基营养，促进菌丝发酵过程，同时，促进TSA与菌丝体细胞通路的活性位点结合，促进真菌次级代谢产物的产生和生长，增加菌丝体次级代谢产物的产量和多样性；