[发明专利]一种金银花叶抗炎活性组分及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种金银花叶抗炎活性组分的制备方法，其包括如下步骤：1）将粉碎过的干燥金银花叶先进行石油醚脱脂处理，然后用甲醇回流提取获得粘稠状粗提物；2）用二次水溶解粘稠状粗提物获得悬浮液，再用正丁醇萃取，并经减压浓缩获得正丁醇相；3）将正丁醇相进行柱层析分离，分别用10%、20%、30%、40%、50%、60%和70%的甲醇水溶液进行洗脱，选取50%甲醇水溶液洗脱所得的馏分即得。本发明通过对5‑LOX的抑制作用研究、对小鼠巨噬细胞系RAW264.7抗炎作用研究和对大鼠足肿胀抗炎的作用研究，发现金银花叶抗炎活性组分（M1）具有优良的抗炎活性，可为抗炎药物的研发提供理论依据。

技术领域

本发明属于分析化学和生物医药技术领域，具体涉及一种金银花叶抗炎活性组分、制备方法及其抗炎应用。

背景技术

忍冬（英文名：Lonicera japonica），又名“金银花”，为半常绿藤本植物，忍冬科忍冬属，始载于《名医别录》。忍冬作为一种历史悠久的常用中药，自1995年，就有超过500种含有忍冬的中药处方被收录入《中华人民共和国药典》。 金银花叶(Leaves of Lonicerajaponica，简称LLJ)，早在明清时代就有记载“忍冬茎叶及花功用皆同”、 “藤叶皆可用”。忍冬性寒味甘，具有清热解毒，疏散风热的功效。

现有技术中，常用金银花来制作茶或茶饮料，如CN201510718865.6金银花茶的制备方法，中国专利CN200810074299.X公开了一种金银花茶饮料等。炎症是机体组织对损伤因素产生的应激性的防御反应，体表的外伤感染和各组织器官的常见多发病症都属于炎症性的疾病。目前，尚未有关于金银花叶具有抗炎活性的相关报道。因此，开展金银花叶抗炎活性的相关研究意义重大，并且可以有效提升金银花叶子作为非药用部位的资源利用率。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术缺陷，提出一种金银花叶抗炎活性组分，为抗炎药物的研发提供理论依据。

本发明还提供了上述金银花叶抗炎活性组分的制备方法及其应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种金银花叶抗炎活性组分的制备方法，其包括如下步骤：

1）将粉碎过的干燥金银花叶先进行石油醚脱脂处理，然后用甲醇回流提取获得粘稠状粗提物；

2）用二次水溶解粘稠状粗提物获得悬浮液，再用正丁醇萃取，并经减压浓缩获得正丁醇相；

3）将正丁醇相进行柱层析分离，分别用10%、20%、30%、40%、50%、60%和70%的甲醇水溶液进行洗脱，选取50%甲醇水溶液洗脱所得的馏分即为金银花叶抗炎活性组分。

为了获得较好的脱脂处理效果，步骤1）中，脱脂处理具体为：将粉碎过的干燥金银花叶与石油醚按料液比1g：20―60ml在索氏提取器中混合后，于70―90℃脱脂至索氏提取器中溶液变成无色即可。

为了获得较好的回流提取效果，步骤1）中，回流提取具体为：按料液比1g：10―50ml加入浓度70―95%甲醇，回流提取2―5次，每次2―5h，回流提取结束后合并提取液即为粘稠状粗提物。

为了获得较好的萃取效果，步骤2）中，用二次水超声溶解粘稠状粗提物获得悬浮液，再用正丁醇等体积萃取。

本发明提供了采用上述制备方法制备得到的金银花叶抗炎活性组分。

本发明还提供了上述金银花叶抗炎活性组分在体外酶模型、巨噬细胞模型及小鼠足肿胀模型抗炎研究中的应用。

本发明还提供了上述金银花叶抗炎活性组分在制备抗炎药物中的应用。

和现有技术相比，本发明的有益效果在于：