[发明专利]一种加工型辣椒抗疫病新种质的选育方法

说明书

本发明属于辣椒培育技术领域，公开了一种加工型辣椒抗疫病新种质的选育方法；在无菌条件下将花蕾用镊子剥开，取出花药置于培养基的培养皿；将诱导出的胚状体转接到MS培养基上诱导成苗；筛选出的抗疫病材料练苗，移栽到营养钵中，移栽成活后人工加倍，将分子标记检测为抗疫病的花培再生植株进行苗期接种疫病抗性鉴定；收种后扩繁，播于穴盘中，待植株长至6‑8片叶时采用灌根法接种疫霉菌，接种浓度为10³个游动孢子/mL，接种7d后调查发病情况；根据病情指数确定花培再生植株的疫病抗性。从花药培养接种到获得抗性纯合基因型材料，节大量省人力物力和财力，使创制的抗性DH系能尽快的应用到育种实践，大大缩短抗性新品种育种进程。

技术领域

本发明属于辣椒培育技术领域，尤其涉及一种加工型辣椒抗疫病新种质的选育方法。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：辣椒疫病是一种由辣椒疫霉菌引起的土传病害，1918年在美国墨西哥洲首先被发现。在国内，在江苏省首先发现辣椒疫病，该病曾在长春大范围爆发，20世纪70～80年代在我国新疆，辣椒疫病成为毁灭性病害。近年来，国内外研究者对辣椒疫病发病机理及抗病机制进行了广泛的研究。辣椒疫病具有空气传染性和土壤传染性两种性质，但以土壤传播为主，加之发病的突发性强，流行速度极快，因而药剂防治和栽培防治措施效果不佳。培育抗疫病的辣椒品种是解决这一问题最经济有效的途径。国内外已用人工接种鉴定技术筛选出一些抗疫病的辣椒资源，但这些抗性资源的农艺性状及品质性状较差，不能直接作为育种材料来使用，需要将其优良抗性转育到商业品种上。传统的抗性转育方法主要是杂交，这样在导入抗病基因的同时不可避免地引入不良农艺性状及品质性状，育种实践中急需建立一种更为有效的育种选择方法。

综上所述，现有技术存在的问题是：传统的抗性转育方法主要是杂交和多代回交，获得基因型纯合的抗性材料需要5-7代，浪费大量的人力物力财力，已成为限制抗病育种进程的关键因素之一。育种实践中急需建立一种更为有效的抗性材料创制方法。

解决上述技术问题的难度和意义：利用花药培养技术获得基因型纯合的抗性材料需要1-2代，与常规方法相比极大的缩短了育种年限，省时省力。但是，文献报道加工型辣椒花药培养诱导率最高的为天时辣椒578，诱导率为4.86％。而抗疫病加工型辣椒花药培养诱导率尚未见相关报道，在几年的研究中发现抗疫病加工型辣椒的花蕾较甜椒瘦小，胚状体诱导率低，极大的限制了该技术在育种实践中的应用。因此提高抗疫病加工型辣椒花药培养胚状体诱导率是是解决该问题的重中之重。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种加工型辣椒抗疫病新种质的选育方法。

本发明是这样实现的，一种植物生长物质，所述植物生长物质为0.05mg/L6-BA+0.01mg/L 2,4-D。

本发明的另一目的在于提供一种使用所述植物生长物质的辣椒种质的选育方法。

本发明的另一目的在于提供一种使用所述植物生长物质的辣椒抗疫病新种质的选育方法，所述辣椒抗疫病新种质的选育方法包括：

步骤一，在无菌条件下将花蕾用镊子剥开，取出花药置于培养基的培养皿，培养皿封口膜封口后置于人工气候箱中35℃高温预处理5d；在白天温度28℃，夜晚温度20℃的组培室中培养，60d后统计出胚个数；

步骤二，将诱导出的胚状体转接到MS培养基上诱导成苗，30天继代1次，待苗子长到3-4片叶时，每个株系取1片嫩叶用CTAB法提取基因组DNA，之后用标记RQ01/FQ01对其进行疫病抗性进行初步检测；

步骤三，将筛选出的抗疫病材料练苗，移栽到营养钵中，移栽成活后人工加倍，将分子标记检测为抗疫病的花培再生植株进行苗期接种疫病抗性鉴定；分子标记辅助选择确定为抗疫病的花培再生植株于花期包花使其自交授粉；