[发明专利]一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法

权利要求书

1.一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法，其特征是包括以下步骤：

步骤1、灵芝母种制备：

从中国工业微生物菌种保藏管理中心购买灵芝菌株，以PDA培养基进行活化；使用活化用PDA培养基配方如下：去皮马铃薯200g煮汁，V_B10.01g/l、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；葡萄糖20g、琼脂18g、水1000ml， pH自然；在30℃，遮光培养；

从活化好的优势菌落的边沿挖取菌丝，接种到驯化培养基中；使用驯化用斜面培养基斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各10g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；在28℃，遮光培养；

从驯化培养基中挑选长势旺盛的菌丝体接种到母种培养斜面上，在18~30℃下，遮光培养到菌丝铺满3/4斜面，放入4℃冷藏柜，避光保存备用；母种斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；

步骤2、灵芝液态发酵菌种制备：

在2000ml大锥形瓶中装如1200ml液体培养基，接种3个母管驯化好的灵芝母种，摇床上以最小的摇动频率，在28~30℃下，遮光培养，直到形成密集的菌丝球即可用于固态发酵的接种剂；液体培养基配方：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，调节pH6.0；

步骤3、灵芝固体发酵培养基制备：

灵芝固体发酵培养基配方：富硒高粱种子粉65~75份、富硒螺旋藻粉25~35份，水35~45份，充分混合均匀装入底部铺垫3层无菌纱布的不锈钢蒸笼中，厚度4cm，摊平覆盖3层无菌纱布，100℃蒸汽蒸煮30min，冷却，搬入无菌培养室；

步骤4、灵芝培养与菌丝溶解：

在无菌培养室中，严格按照无菌接种要求，掀开表层覆盖纱布、向灭菌后的固体发酵培养基中接种液态发酵菌种，接种量为固体培养基重量的15%~20%；重新覆盖纱布；在28~30℃下，遮光培养到菌丝全面覆盖培养基，整个过程持续3~5天；

将发酵充分的灵芝培养料装入灭菌好的陶瓷大罐中，保鲜膜封口，移入无菌加工车间智能培养箱中，把温度升高到45℃，保温4~6小时，酶解充分后，立即转入热风干燥箱中80℃下鼓风干燥到含水率低于12%；

步骤5、富硒灵芝粉制备：

将步骤4制备的灵芝干发酵料以锤片式粉碎机过80~120目网；再以超微粉碎机粉碎过250~300目筛网，得到有机硒含量300~500mg/kg的超微化富硒灵芝粉，以100ml塑料瓶或棕色玻璃瓶灌装密封；产品可以用于食品有机硒的安全添加。