[发明专利]一种RGT肽及其衍生物在流体条件下的应用

说明书

本发明提供了一种RGT肽及其衍生物的应用，其特征在于，用于制备在流体条件下的血液中选择性阻断整合素β3介导的外向内信号从而抑制流体条件下血小板粘附聚集的药物，其中，流体状态下的血液的剪切率小于500S^‑1。该RGT肽及其衍生物能够用于抑制在剪切率小于500S^‑1的流体条件下的血小板粘附聚集，因而能够适用于对应疾病的预防和治疗以及相关的科学研究。

技术领域

本发明属于细胞生物工程技术领域，具体涉及一种RGT肽及其衍生物在流体条件下的应用。

背景技术

人体血液循环中的血小板在血管下内皮受损，胶原暴露的时候能够通过粘附聚集等一系列反应诱导血栓形成，从而产生血栓并进一步达成止血。其中，介导血小板粘附聚集的三要素是：激动剂、可溶性粘附蛋白(纤维蛋白原)和膜受体(整合素αIIbβ3)(KoreanCirc J.2012；42(5):295-301.)。

内皮细胞分泌的血小板活化抑制因子使得完整的血管内不易形成稳定的血栓。然而，一旦血管内皮因外伤或动脉粥样硬化而发生破损，导致内皮下基质成分暴露，血小板即可迅速粘附到基质上以限制出血、促进组织修复。其中，这些基质包括多种粘附大分子，如胶原、vWF、层连蛋白、纤连蛋白和凝血酶敏感蛋白等(Annu Rev Biomed Eng.1999；1:299-329.)。

上述作用将使血小板中的可活化受体(如αIIbβ3)与内皮下基质蛋白之间发生作用，并使血小板与基质之间形成稳定粘附。同时，αIIbβ3也可以与血浆其他成分及血管壁蛋白(包括纤维蛋白原)结合(Annu Rev Biomed Eng.1999；1:299-329，Annu Rev CellBiol.1990；6:329-57.)，从而参与血小板的粘附聚集过程。

由于血栓的产生与血小板的粘附聚集过程相关，因此现有技术中出现了一些改变血小板作用从而治疗血栓的药物，其中一些能够通过完全抑制整合素αIIbβ3的信号转导作用来抑制血小板粘附聚集，从而抑制血栓形成。然而，由于不具有选择性，这类药物通常会对血小板的内向外和外向内双向信号无选择性的抑制，在抑制血栓形成的同时会影响人体的正常止血功能，造成微、小血管的出血等副作用，因此通常只在血栓较为严重时进行短时或者支架后瞬时用药。

RGT是一个氨基酸顺序为精氨酸-甘氨酸-苏氨酸的三肽，其十四烷酰化修饰的衍生物(即myr-RGT)具有选择性抑制整合素αIIbβ3介导的血小板外向内信号转导过程的作用，因此，能够实现在抑制血小板血栓形成的同时基本不影响正常止血功能的效果。RGT肽能够在血液静止状态下抑制血小板的粘附聚集(参见申请号为CN200610117991.7的中国专利申请文件)。

然而，血小板在体内发挥止血和血栓形成的作用是在血液中流动的状态下实现的。研究表明，正常的冠状动脉、颈动脉以及大脑中动脉，剪切率范围在200-500S^-1，微狭窄大中动脉或小动脉剪切率大约在500S^-1，静脉的剪切率大约在20-200S-¹，轻度狭窄的大中动脉或微动脉的剪切率大约在1500S^-1，中度到重度狭窄的大中动脉剪切率大约在5000S^-1(Blood.1996；88(5):1525-41.)。同时，在剪切率小于等于500S^-1时，血小板的粘附聚集主要是由纤维蛋白原/整合素αIIbβ3介导的外向内信号实现的，而当剪切率大于500S^-1时血小板的粘附聚集主要由vWF-GPIb/IX/V介导的信号实现(J Hematol Oncol.2015；8:62.)。

由于人体不同口径的血管的剪切率各不相同，血小板在不同剪切率情况的血液中发挥作用的机制也不同，因此，即使是同一种具有粘附聚集抑制作用的药物，在不同剪切率情况的血液中也可能具有完全不同的药效。对于上述RGT肽及其衍生物来说，即使证实了其在静态血液中所具有的外向内信号抑制作用，仍然无法说明其在实际的血液流体中能够发挥何种作用，进而不能获知其能够实际应用的疾病场景。