[发明专利]一种脑神经组织提取方法

说明书

本发明公开了一种脑神经组织提取方法，涉及生物制药技术领域，解决现有脑神经组织提取工艺复杂且使用有毒溶剂污染环境的问题。本发明包括以下步骤：1)称取冷冻的除人以外的哺乳动物大脑组织，解冻后除去杂质，再将大脑组织粉碎成脑浆；2)将脑浆装入超临界萃取装置进行萃取，得到萃取物；3)将萃取物加入提取设备，并加入乙醇，调节pH，回流提取并过滤得到乙醇提取液和滤渣；4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)；5)收集步骤3)和步骤4)中的乙醇提取液并回收乙醇，得到提取液；6)将提取液冷却后沉淀，过滤得到提取物，将提取物干燥粉碎即得到大脑组织提取物。本发明提取工艺简单、安全无毒，提取物收率大且神经节苷脂含量高。

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，更具体的是涉及一种脑神经组织提取方法。

背景技术

神经节多糖和神经节苷脂是含唾液酸的糖神经鞘脂，存在于哺乳类动物脑细胞膜中，脑神经系统中含量非常丰富，是脑神经细胞膜的及其重要的组成成分，在脑神经中发生、生长、分化过程中起必不可少的作用，对于损伤后的脑神经修复也非常重要，具有促进脑神经再生、促进脑神经轴突生长和突触形成、恢复脑神经支配功能；改善脑神经传导、促进脑电波活动及其它脑神经电生理指标的恢复，保护脑细胞膜、促进脑细胞膜各种酶活性恢复等作用。

神经节多糖和神经节苷脂是一种分子量小的糖脂类复合物质，能穿过血脑屏障进入大脑，直接作用于人脑细胞，镶嵌在受损的神经细胞膜上，稳定和改善神经细胞膜的物质交换功能，通过促进各种形态、生化、组化、神经生理及行为参数的改善，促使凋亡的神经细胞恢复活力。具有促进神经细胞及大脑组织的正常发育、修复损伤神经及大脑组织作用。是用于溶栓、抗凝或止血和新生儿缺氧缺血性脑病的有效物质，对改善记忆能力、修复脑损伤、老年痴呆及帕金森氏病有一定的改善作用。

现有神经节苷脂的提取方法大多采用有机溶剂提取法，如专利申请号为201310187229.6的一种动物神经节苷脂与脑苷脂提取方法与其应用，先用氯仿与甲醇以2：1混合的混合溶剂提取出脂肪，再用石油醚提取出脂肪中的神经节苷脂和脑苷脂，固体为脑苷脂，液体为溶有脂肪的石油醚溶液；在低温4℃条件下，将前述得到的脑苷脂内加入无水乙醇，将残留的石油醚洗出，固液分离，得到无溶剂残留的脑苷脂；前述溶有脂肪的石油醚溶液经过蒸馏，将石油醚蒸发出，取固体，在此固体中加入固体重量的3～30倍的丙酮，固液分离，取固体得到神经节苷脂，将得到的神经节苷脂内加入神经节苷脂重量的3～30倍的无水乙醇，搅拌均匀，将残留的丙酮洗出，固液分离，取固体，得到无溶剂残留的神经节苷脂。该提取方法先用有机溶剂丙酮分离再用无水乙醇洗出神经节苷脂中的丙酮，提取工艺复杂且污染环境。

发明内容

本发明的目的在于：为了解决现有脑神经组织提取工艺复杂且使用有毒溶剂污染环境的问题，本发明提供一种安全无毒的脑神经组织提取方法，提取收率高且提取物中神经节苷脂含量高。

本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：

一种脑神经组织提取方法，包括以下步骤：

1)称取冷冻的除人以外的哺乳动物大脑组织，解冻后除去杂质，再将大脑组织粉碎成脑浆；

2)将脑浆装入超临界萃取装置进行萃取，得到萃取物；

3)将萃取物加入提取设备，并加入乙醇，调节pH，回流提取并过滤得到乙醇提取液和滤渣；

4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)；

5)收集步骤3)和步骤4)中的乙醇提取液并回收乙醇，得到提取液；

6)将提取液冷却后沉淀，过滤得到提取物，将提取物干燥粉碎即得到除人以外的哺乳动物大脑组织提取物。

优选地，所述步骤2)中超临界流体为二氧化碳，萃取温度为30-50℃，萃取压力为10-30MPa，萃取时间1-3h。