[发明专利]控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子

说明书

通过将存在于CH1和CL的界面的氨基酸取代成带电荷的氨基酸，可以抑制CH1与CL的缔合，与使用向CH3中单独导入knob(突起)和hole(空隙)的修饰相比，高效率地形成了异源分子。

本申请是国际申请号PCT/JP2012/078103，国际申请日2012年10月31日，进入中国国家阶段日期为2014年6月27日，中国国家阶段申请号为201280065166.0，发明名称为“控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子”的分案申请。

技术领域

本发明涉及控制了重链与轻链的缔合的抗体、控制了重链与轻链的缔合的抗体的制备方法、抗体的重链与轻链的缔合控制方法、以及含有该抗体作为有效成分的药物组合物等。

背景技术

作为具有人恒定区的IgG型双特异性抗体(单臂具有针对抗原A的结合特异性、而另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的具有人恒定区的IgG型抗体)的制作方法，迄今为止报道了几种方法。通常，IgG型双特异性抗体包含两种H链(即针对抗原A的H链和针对抗原B的H链)和两种L链(即针对抗原A的L链和针对抗原B的L链)。使这样的IgG型双特异性抗体表达时，由于使两种H链和两种L链表达，所以作为H2L2的组合，认为有10种组合。其中一种是具有目标结合特异性(单臂具有针对抗原A的结合特异性、另一单臂具有针对抗原B的结合特异性的IgG)的组合。因此，为了获得目标双特异性抗体，需要从10种抗体中纯化出一种目标抗体，纯化的效率非常低且难以进行。

作为解决该问题的方法，有人报道了通过对IgG H链的CH3区实施氨基酸取代，使针对抗原A的H链和针对抗原B的H链的异源组合的IgG优先分泌的方法(专利文献1、2、3、4和非专利文献1、2)。在这些方法中，有人报道了利用“突起；knob”和“空隙；hole”的物理障碍的方法、或利用电荷排斥的方法。

为了进一步高效地获得目标分子，有人报道了使用使针对抗原A的L链和针对抗原B的L链形成相同的氨基酸序列的共通L链的方法(专利文献5、6)。但是，通过使用共通L链，对抗原的亲和性有可能大幅降低，未必是最佳的方法。因此，为了使双特异性抗体以强亲和力与两个抗原结合，优选只有针对抗原A的H链与L链缔合、以及只有针对抗原B的H链与L链缔合。而且，为了使针对各自的抗原的H链与L链缔合而与可变区无关，有人报道了不是对可变区而是对作为恒定区的CH1和CL结构域实施氨基酸取代的方法(专利文献2、7)。但是，还不足以有效地生产目标双特异性抗体。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO 96/27011；

专利文献2：WO 2006/106905；

专利文献3：WO 2009/089004；

专利文献4：WO 2010/129304；

专利文献5：WO 98/050431；

专利文献6：WO 2006/109592；

专利文献7：WO 2007/147901；

非专利文献

非专利文献1：Ridgway JB等人著，Protein Engineering，1996年，第9卷，第617-621页；

非专利文献2：Merchant AM等人著，Nature Biotechnology，1998年，第16卷，第677-681页。

发明内容

发明所要解决的课题