[发明专利]羊肉中鸡源成分的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法

说明书

本发明提供了羊肉中鸡源成分的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法，属于生物学检验检疫领域。本发明提供的羊肉中鸡源成分的检测引物，具有较好的特异性，能特异性的检测出鸡肉成分；而将羊肉中鸡源成分的检测引物应用到检测试剂盒中，能更加方便于检测的实施；羊肉中鸡源成分的检测方法，能通过检测并计算出样品中鸡肉成分的含量，是一种稳定、准确、有效的定量检测方法，具有较好的实际应用价值。

技术领域

本发明涉及生物生物学检验检疫领域，具体而言，涉及羊肉中鸡源成分的检测引物、检测试剂盒及应用与检测方法。

背景技术

随着人们生活水平不断提高，羊肉作为低脂肪、低胆固醇及高蛋白的保健性肉类食品，越发受到广大消费者的喜爱。据统计，2016年羊肉行业产量就达454万吨，预测2022年其产量能上升到533万吨[1]。巨大的羊肉消费市场，导致羊肉制品掺假事件频繁发生，引起了全社会的广泛关注。许多不法商贩为谋取暴利，利用低价肉部分填充或全部替代高价肉，如羊肉中掺入鸭肉、狐狸肉、猪肉、马肉、鸡肉、鼠肉等。据文献报道，2013～2015年中国北京、广东、山东、天津、上海等地区的羊肉制品中均检测发现存在鸡源性成分，但目前的国家标准、行业标准检测方法都只能定性检测，无法有效区分故意掺假还是无意污染，不能有效保证监管部门的正确执法。因此，急需建立一种稳定、准确、有效的定量检测方法，为执法监管部分提供具有说服力的检测结果，做到不错查、不漏查。

发明内容

本发明的第一目的在于提供羊肉中鸡源成分的检测引物，能方便快捷的检测羊肉中的鸡源成分。

本发明的第二目的在于提供上述的羊肉中鸡源成分的检测引物在检测羊肉中鸡源成分中的应用。

本发明的第三目的在于提供上述的羊肉中鸡源成分的检测引物在制备检测羊肉中鸡源成分的试剂盒中的应用。

本发明的第四目的在于提供一种羊肉中鸡源成分的检测试剂盒，通过该试剂盒，方便实验，便于操作。

本发明的第五目的在于提供一种羊肉中鸡源成分的检测方法，通过该方法，能快速检测和得到待检样品中鸡源成分质量百分含量，为市场监督提供可靠的参考。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

羊肉中鸡源成分的检测引物，检测引物包括检测羊肉成分的第一引物对和第一探针，以及检测鸡源成分的第二引物对和第二探针；第一引物对的碱基序列如SEQ ID NO.1-2所示，第一探针的碱基序列如SEQ ID NO.3所示，第二引物对的碱基序列如SEQ ID NO.4-5所示，第一探针的碱基序列如SEQ ID NO.6所示。

上述的羊肉中鸡源成分的检测引物在检测羊肉中鸡源成分中的应用。

上述的羊肉中鸡源成分的检测引物在制备检测羊肉中鸡源成分的试剂盒中的应用。

一种羊肉中鸡源成分的检测试剂盒，检测试剂盒包括上述的羊肉中鸡源成分的检测引物。

一种羊肉中鸡源成分的检测方法，检测方法包括以下步骤：

取鸡肉和羊肉样品分别提取基因组DNA，进行ddPCR和荧光定量PCR，确定鸡肉样品和羊肉样品的基因拷贝数和Ct值的线性关系；

定量取样鸡肉样品和羊肉样品，并分别提取的基因组DNA，进行ddPCR试验，获得鸡肉样品和羊肉样品质量与基因拷贝数的线性关系；

通过基因拷贝数和Ct值的线性关系以及质量与基因拷贝数的线性关系，获得鸡肉样品和羊肉样品质量与Ct值的关系，并得到鸡肉与羊肉质量百分比关系；

取待检样本并提取基因组DNA，进行荧光定量PCR试验，获得待检样本的Ct值，通过鸡肉样品和羊肉样品质量与Ct值的关系，计算得到待检样本鸡肉含量的百分比。