[发明专利]一种提取真菌基因组DNA的方法在审
| 申请号： | 201811048739.4 | 申请日： | 2018-09-10 |
| 公开（公告）号： | CN109022422A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 冀瑞卿;孟黎鹏;邢鹏杰;高婷婷;格雷格瑞·博尼托;李长田;徐洋;李冠霖;李玉 | 申请（专利权）人： | 吉林农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 杨宏 |
| 地址： | 130118 吉林省长春市*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 真菌基因组DNA 菌丝 基因组DNA 提取液 稀释液 真菌 冻存 放入 菌根 省时 省力 备用 取出 研究 | ||
1.一种提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，包括步骤：
将真菌的菌丝或菌根加入备有提取液的PCR管中；
将PCR管放入PCR仪中，在90-100°C下处理5-15min；
取出PCR管后加入稀释液；
提取完成，冻存，备用。
2.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，所述提取液的配制步骤如下：
（1）在洁净的容器中加入10mL 1M的Tris溶液；
（2）然后加入1.86g的KCl；
（3）加入0.37g的EDTA；
（4）加入80mL的DI水，摇动直至完全溶解；
（5）加入1M NaOH溶液至pH达到9.5；
（6）利用DI水定容至100mL；
（7）无菌过滤器除菌过滤，分装在2mL的离心管，-20°C保存备用。
3.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，所述稀释液的配制步骤如下：
（1）加入3g的牛血清蛋白放在洁净容器中，用DI水定容到100mL；
（2）完全溶解后，无菌过滤，分装在2mL的离心管中备用。
4.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，以体积计，所述稀释液加入的量为所述提取液的3倍。
5.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，在95°C下处理10min。
6.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，放入-20°C下冻存。
7.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，提取完成后，还包括步骤：通过琼脂糖凝胶电泳检测DNA的有无。
8.根据权利要求1所述的提取真菌基因组DNA的方法，其特征在于，提取完成后，还包括步骤：采用分光光度计法，通过在260-280nm下的吸光度值得到提取的DNA的浓度。
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