[发明专利]一种肿瘤微环境特异性活化的缺氧诱导型嵌合抗原受体

权利要求书

1.一种肿瘤微环境特异性活化的缺氧诱导型嵌合抗原受体，其特征在于，所述肿瘤微环境特异性活化的缺氧诱导型嵌合抗原受体包括两部分组件，第一部分组件包括信号肽、胞外抗原特异性结合结构域、细胞外间隔区结构域、跨膜结构域、共刺激信号结构域、细胞因子信号传导结构域和胞内信号传导结构域；其中信号肽选自人CD8α信号肽，其氨基酸序列为SEQ ID NO：3；胞外抗原特异性结合结构域为抗人CD19蛋白分子的scFv，氨基酸序列为SEQ ID No：4；胞外间隔区结构域为CD8分子的铰链区，氨基酸序列为SEQ ID NO：5；跨膜结构域为CD8分子的跨膜结构域，其氨基酸序列SEQ ID NO：6；共刺激信号结构域为4-1BB分子的共刺激信号结构域，其氨基酸序列为SEQ ID NO：7；胞内信号传导结构域为CD3ξ分子的信号传导域，其氨基酸序列为SEQ ID NO：8；细胞因子信号传导结构域包括IL-7R、IL-15R、IL-21R及其组合；第二部分组件为氧依赖降解结构域；所述氧依赖降解结构域（ODD）取自缺氧诱导因子1α（HIF-1α），氨基酸序列为SEQ ID NO：1; 所述氧依赖降解结构域通过连接肽与第一部分组件相连，该连接肽为1-50个富含甘氨酸（Gly）或丝氨酸（Ser）残基，其氨基酸序列为SEQ ID NO：2的柔性连接肽；上述肿瘤微环境特异性活化的缺氧诱导型嵌合抗原受体为CD19 Hi-CAR，其氨基酸序列如SEQ ID NO：11所示。

2.一种病毒载体，其特征在于，该载体编码如权利要求1所述的缺氧诱导型嵌合抗原受体。

3.根据权利要求2所述病毒载体，其特征在于，所述病毒载体包括但不限于逆转录病毒、慢病毒、腺病毒、腺相关病毒及其组合。

4.一种基因工程化免疫细胞，其特征在于，所述免疫细胞转导权利要求2所述病毒载体。

5.根据权利要求4所述的基因工程化免疫细胞，包括但不限于未经分选纯化的T细胞、分选纯化的PD-1⁺ T细胞、分选纯化的CD137⁺ T细胞、分选纯化的CD160⁺ T细胞、分选纯化的纯真T细胞（Tnaive）、分选纯化的中央记忆型T细胞（T_CM）、分选纯化的效应记忆型T细胞（T_EM）、分选纯化的效应T细胞（T_EMRA）、分选纯化的过渡记忆型T细胞（Transitional MemoryT cells，T_TM）、分选纯化的组织记忆型T细胞（Tissue residential memory T cells，T_RM）、天然杀伤细胞（Natural killer cells，NK）、天然杀伤T细胞（Natural killer T cells，NKT）、固有淋巴细胞（(Innate lymphoid cells, ILC）。