[发明专利]一株巨大芽孢杆菌及其在防治西洋参根腐病中的应用

说明书

本发明公开了一株巨大芽孢杆菌及其在防治西洋参根腐病中的应用。该菌株为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)Yt2001，保藏编号为CGMCC No.14673。实验表明，本发明的巨大芽孢杆菌菌株Yt2001具有生长速度快、产孢量大、抗逆性强、防治西洋参根腐病效果好，在西洋参根际能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。由该巨大芽孢杆菌菌株Yt2001制备的生物防治制剂，可以作为生物农药或生物肥料，防治西洋参根腐病的防治效果高达80％以上。

技术领域

本发明属于生物防治植物病害领域。具体而言，本发明涉及一株巨大芽孢杆菌及其在防治西洋参根腐病中的应用，以及采用该巨大芽孢杆菌制备的生物防治制剂。

背景技术

西洋参根腐病是由真菌半知菌亚门镰孢菌属引起的植物病害，属于土传病害，主要通过土壤内水分、地下昆虫和线虫传播。根腐病主要危害幼苗根部和根茎部(地表以下茎部)，病情严重时，主根可烂掉1/3-1/2。腐烂的参根呈黑褐色湿腐状，后期糟朽状，仅存中空的根皮。被害参苗地上部初期无明显症状，中后期叶片退绿变黄、萎蔫死亡。

西洋参根腐病给参户造成巨大的经济损失。对于西洋参根腐病的防治，常规采用的方法包括传统的化学防治、培育抗病品种以及生物防治。化学防治使用药剂如“恶霉灵”、“叶枯唑”等，但药效时间短、使用量大，易造成农药残留，环境污染等问题；同时，化学农药的长期使用，使得病原菌对其产生抗药性，导致防效下降甚至失败。抗病品种研发周期长，投入大，推广慢,可能影响西洋参的品质。生物防治主要是利用有益的微生物，通过生物间的竞争作用、抗菌作用、重寄生作用、交叉保护作用及诱发抗病性等来抑制某些病原菌的活性和活动，具有无毒、无污染、不产生抗药性、高效的优点，表现出广阔的应用前景。

芽孢杆菌是一种广泛分布于各种不同生活环境中的腐生细菌，是一群好氧兼厌氧的产芽孢革兰氏阳性杆菌的总称，可以产生内生耐热抗逆的芽孢。芽孢不仅对热有抗逆性，还对紫外线、电磁辐射及一些化学药品有很强的抗逆性，它可以忍受各种不良环境。由于具有如此强的抗逆性，使得它有利于生防菌剂的生产和剂型加工，也利于其在环境中的存活、定殖与繁殖。由于它们生长快、营养简单、能够形成具有较强抗逆性能力的芽孢，在产品开发中较非芽孢杆菌有效活菌数量高、性能稳定等优势而备受瞩目。芽孢杆菌属下的巨大芽孢杆菌是一种抑菌谱较广的生防菌，对不同植物的真菌和细菌病害具有防治作用，如烟草灰霉病、水稻枯瘟病、香蕉灰斑病等，其中，对真菌病原菌的抑制能力强于细菌病原菌的抑制。巨大芽孢杆菌通过在生长发育过程中产生多种拮抗性或竞争性的代谢产物，以直接或间接方式阻碍或杀死病原菌，具有高效、低残留、与环境友好等优点。

发明内容

本发明的目的是提供一株用于高效防治西洋参根腐病的新的芽孢杆菌——巨大芽孢杆菌菌株Yt2001。本发明的菌株具有生长速度快、产孢量大、防治效果好、抗逆性强，在植物根际能够快速大量定殖等特点，因此具有良好的应用前景。

本发明所提供的菌株为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)Yt2001，是从山东省威海市文登区侯家镇江山泊村参田中分离获得的，已于2017年9月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所)，保藏编号为CGMCC No.14673。

本发明巨大芽孢杆菌(Bacillus magaterium)菌株Yt2001的培养方法或繁殖方法包括：

(1)普通培养保存采用LB培养基，配方为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，琼脂15-20g，蒸馏水1000mL，pH调至7.0-7.2；

(2)实验室液体培养采用LB液体培养基，配方为：胰蛋白胨10g，酵母提取物5g，氯化钠10g，蒸馏水1000mL，pH调至7.0-7.2；