[发明专利]一种基于LBL法修饰肝素分离细胞外囊泡的方法

权利要求书

1.一种基于LBL法修饰肝素分离细胞外囊泡的方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)首先通过LBL层层修饰的方法，以静电吸附的原理，在若干带正电的纳米球上逐层交替修饰肝素和聚二烯丙基二甲基氯化铵PDADMAC；修饰层从内到外按照肝素、PDADMAC、肝素的顺序进行排列，修饰层的层数为大于等于三层的奇数层；

(2)将修饰后的纳米球加入到含有细胞外囊泡的体液中反应5min-120min后，离心或者磁吸附收集纳米球；

(3)在收集的纳米球中加入2.0～2.5mol/L氯化钠溶液反应10～20min，吸附在纳米球表面的细胞外囊泡洗脱到氯化钠溶液中，通过离心或者磁吸附弃去纳米球，实现体液中细胞外囊泡的分离。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，带正电的纳米球是由聚苯乙烯、四氧化三铁、硅或二氧化硅材质的纳米球经过氨基化或者硅烷化处理获得。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，带正电的纳米球的个数为5万-100万个，其粒径在50纳米～10微米之间。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，使用肝素的水溶液或者PBS溶液在带正电的纳米球上修饰肝素，修饰时间为1～60min；使用PDADMAC的水溶液或者PBS溶液在带正电的纳米球上修饰PDADMAC，修饰时间为1～60min。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，肝素的水溶液或者PBS溶液的浓度为0.5mg/mL-20mg/mL，PDADMAC的水溶液或者PBS溶液的浓度为0.5mg/mL-20mg/mL。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，体液选自血浆、尿液、乳汁、胆汁或唾液中任一种。