[发明专利]一种人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC及其应用

说明书

本发明公开了一种人工合成的Bt抗虫基因JBT‑AC，所述Bt抗虫基因JBT‑AC的核苷酸序列用SEQ ID No 1所示。Bt抗虫基因JBT‑AC较其密码子优化前更容易获得高表达的转基因植株。抗虫基因JBT‑AC可在转基因玉米中稳定遗传和表达，且表达量高，所得转基因玉米抗虫性好。

技术领域

本发明属于抗虫基因工程领域，具体涉及一种人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC及其应用。

背景技术

玉米是主要粮食作物之一，全世界有超过10亿的人口以玉米为主食。虫害是造成玉米减产的主要原因之一。在现代农业中，使用化学杀虫剂为减少虫害损失起到了巨大作用。但是,化学杀虫剂的使用会不可避免的造成环境污染以及威胁人类健康。利用转基因技术培育具有抗虫性状的品种是一种控制害虫、减少环境污染的有效方法。

Bt-toxin是苏云金芽孢杆菌在孢子形成时期所产生的一种杀虫毒素，苏云金芽孢杆菌的毒蛋白基因(简称Bt-toxin)是目前世界上应用最为广泛的抗虫基因。

虽然早期的转抗虫基因植物或多或少都对昆虫有些抗性，但杀虫蛋白在植株上的表达量很低，抗虫效果不理想。其主要原因是目前使用的杀虫晶体蛋白大多来源于细菌，与高等植物结构基因正常的序列相比，基因含有较多的AT碱基和ATTTA重复序列。AT富含区在高等植物中被认为是不能表达的内含子，ATTTA重复序列的mRNA的稳定性差，二者都不能在高等植物中编码。此外，Bt基因中的偏爱密码子与植物中的不同，以及共同存在的一些不稳定元件如poly(A)信号序列、切割序列、终止序列等都直接影响着Bt基因在植物中的mRNA特性。

抗虫基因虽然对人畜无毒，不破坏环境，但目前普遍存在获得的转基因植物抗虫效率低的问题。抗虫基因大多来源于细菌等微生物，其密码子与植物有较大差异，因此，对天然Bt基因进行改造，合成新的抗虫基因，使抗虫基因适合在植物受体细胞中表达，从而提高转基因植株的杀虫性是目前急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC。

本发明的第二个目的是提供人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC在制备抗虫植物中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC，所述Bt抗虫基因JBT-AC的核苷酸序列用SEQID No 1所示。

上述的人工合成的Bt抗虫基因JBT-AC在制备抗虫植物中的应用。

本发明的优点：Bt抗虫基因JBT-AC较其密码子优化前更容易获得高表达的转基因植株。抗虫基因JBT-AC可在转基因玉米中稳定遗传和表达，且表达量高，所得转基因玉米抗虫性好。

附图说明

图1为JBT-AC基因设计过程。

图2为JBT-AC基因的植物表达载体。

图3为转JBT-AC基因的玉米RT-PCR检测结果。

具体实施方式

以下的实施例便于更好地理解本发明，但并不限定本发明。

下述实施例中所用方法如果没有特别的说明，均为常规方法，所用术语和缩写均是本领域技术人员通用的术语和缩写。

天塔五号玉米种子购自天津科润津丰种业有限责任公司。本申请以玉米种为例，实验证明，其它植物也可以用于本发明。

C58农杆菌感受态购自武汉淼灵生物科技有限公司。

含有基因Bar的质粒pCAMBIA3301购自武汉淼灵生物科技有限公司。

实施例1 JBT-AC基因的设计改造