[发明专利]通过过滤从生物样品提取或分离罕见细胞的多种分析方法有效
申请号: | 201811062672.X | 申请日: | 2013-05-23 |
公开(公告)号: | CN109517895B | 公开(公告)日: | 2022-05-10 |
发明(设计)人: | 苏菲·拉热;帕特里齐亚·帕特里尼-布雷绍;保罗·霍夫曼;蒂埃里·卡派德 | 申请(专利权)人: | 瑞儿塞尔斯公司;法国公立援助医院;国家健康与医学研究院;雷卡尔巴黎大学;尼斯大学;尼斯大学医学中心 |
主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/02 |
代理公司: | 北京派特恩知识产权代理有限公司 11270 | 代理人: | 陈万青;姚开丽 |
地址: | 法国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 通过 过滤 生物 样品 提取 分离 罕见 细胞 多种 分析 方法 | ||
1.一种用于安全且非介入性鉴定胚胎细胞的方法,包括:
(a)用细胞刷非介入性地从孕妇的含有滋养层罕见细胞的宫颈外口(子宫外颈)收集经子宫颈的样品,其中所述样品在妊娠第5到第15周期间收集;
(b)在具有阿尔新蓝的溶液中染色所述经子宫颈的样品的细胞;
(c)使所述样品通过过滤器分离、提取或浓缩滋养层罕见细胞,其中所述过滤器具有回收滋养层罕见细胞的孔径、孔密度或其他物理特性;
(d)对从(c)中回收的未经阿尔新蓝染色的细胞进行免疫标记和/或分子分析以鉴定滋养层罕见细胞,所述滋养层罕见细胞是胚胎细胞。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,在(b)中对(a)中收集的细胞免疫标记的同时进一步进行染色。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述样品在过滤前用固定剂稀释。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中,在(d)中通过细胞形态学染色分析从(c)回收的细胞,并通过激光捕获微切割收集单个滋养细胞,并进行用于基因分型分子分析。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中,在过滤之前用粘液溶解剂处理所述样品。
6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中,在过滤之前用蛋白水解剂处理所述样品。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中通过使用激光微切割,从过滤器中单独收集滋养层罕见细胞,然后裂解细胞蛋白质和分子分析。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中,在(d)的进一步分析之前将经分离、提取、浓缩的滋养层罕见细胞转移到支撑载体。
9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,单独收集经分离、提取、浓缩的滋养层罕见细胞用于(d)中的分析。
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