[发明专利]一种抗人PD-L1抗体及其应用

说明书

本发明涉及免疫技术领域，具体而言，涉及一种抗人PD‑L1抗体及其应用。所述抗体包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，其中所述抗原结合结构域包括选自下述氨基酸序列的至少一个互补决定区，或：与下述氨基酸序列的互补决定区具有至少80％的序列同一性，且与PD‑L1蛋白具有Kd≤8.0×10^‑9mol/L亲和力；互补决定区CDR‑VL1、CDR‑VL2、CDR‑VL3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:1‑3所示；互补决定区CDR‑VH1、CDR‑VH2、CDR‑VH3的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:4‑6所示。所述结合蛋白活性强，与人PD‑L1蛋白具有高亲和力。

技术领域

本发明涉及免疫技术领域，具体而言，涉及一种抗人PD-L1抗体及其应用。

背景技术

世界范围肺癌、特别是女性肺癌发病呈上升趋势，肺癌是我国发病率最高的恶性肿瘤，其死亡率也居恶性肿瘤之首。目前国际发达国家在肺癌的防治上已取得成效，肺癌死亡率正逐年下降，除控烟、早期发现外，靶向治疗为代表的精准治疗手段也使得肺癌患者受益，特别是近年来肺癌的免疫治疗取得实质突破，其有效治疗较传统化疗生存期显著延长。肺癌免疫治疗主要是针对一种表达于衰竭状态T淋巴细胞的表达分子PD-1(程序性死亡受体-1)，利用该分子特异性抗体或其配体(PD-L1)抗体，封阻PD-1-PD-L1介导的T细胞负性调节信号，从而逆转T细胞衰竭态势，恢复其杀伤肿瘤细胞活性，除肺癌这一最大适应症外，PD-1-PD-L1阻断治疗广泛用于黑色素瘤、肾癌、膀胱癌、霍奇金淋巴瘤、头颈部癌、宫颈癌、胃癌、肠癌等MSI-H(高度微卫星不稳定)或DNA错配修复缺陷，具有广谱抗肿瘤活性，目前肺癌PD-1靶点治疗性抗体主要有Keytruda和Opdivo，两者对肺癌患者治疗有效率约20％，接受PD-1抗体治疗的晚期肺癌患者5年生存率提高5-6倍，为此，筛选治疗有效候选患者具有重要临床意义，也可避免盲目用药。目前具有临床指导价值的预测方法包括肿瘤突变载量(TMB)、MSI检测和PD-L1表达分析，PD-L1检测是最为经典的检测方法，国际通行两个检测试剂，分别是Ventana PD-L1兔单克隆抗体(克隆SP142)和PD-L1，IHC 22C3 pharmDx鼠单克隆抗体atezolizumab(克隆22C3)，用于免疫组化伴随检测，已经准入作为临床肿瘤组织PD-L表达水平的标准检测抗体，其检出肿瘤细胞表达率超过50％时，Keytruda可用于一线非小细胞肺癌治疗。此外，PD-L1表达与多种肿瘤预后相关，其检测可以预测存活期。

鉴于具有临床指导价值的潜在预测，局限于肿瘤突变载量(TMB)、MSI检测和组织PD-L1表达分析等几种方法，前两者检测涉及分子生物学手段和核酸全基因组测序，费用高，且依赖于手术或穿刺获得肿瘤组织，在非手术或转移病灶不易获取组织标本患者检测应用受限，此外，TMB和MSI检测尚未被确定为临床标准的检测方法。近年来，上述准入的抗体制剂进行免疫组化PD-L1表达分析(目前FDA批准的唯一诊断伴侣为PD-L1IHC22C3pharmDx-用于筛选pembrolizumab治疗的患者)，相对简便，临床应用更为普遍，目前，这两种试剂批准抗体仅限于免疫组化(IHC)伴随检测，针对肿瘤组织，同样依赖于组织标本获取；此外，PD-L1阴性仍存在不可靠性，检测结果可能因为抗体不同和组织样本不同而异，同是，肿瘤组织异质性，低表达以及诱导基因也可能导致抽样误差或假阴性，特别是免疫组化染色分析，其临床PD-L1组织表达临界值读取存在主观因素，因此，目前PD-L1-IHC阳性仍然是一种不完全反应生物标志物，不能作为筛选PD-1-PD-L1抑制剂治疗患者的“确定性”指标，需要不断发掘精确、简便可行、具有系统性的多组分预测标志物。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种新颖的包含抗原结合结构域的分离的结合蛋白，并对该结合蛋白的制备、应用等方面进行研究。其可高效的用于不依赖于肿瘤患者组织标本的补充PD-L1分析方法，建立起适用于肺癌等恶性肿瘤血液标本测定sPD-L1水平的酶联免疫检测(ELISA)技术，检测时需要采集患者少许血液标本实施检测，血液采集无创或微创，便于反复多次检测，且检测灵敏度高。