[发明专利]一种膀胱癌相关环状RNA的应用和siRNA及其用途

说明书

一种膀胱癌相关环状RNA的应用和siRNA及其用途，属于肿瘤分子生物学技术领域。该膀胱癌相关环状RNA，其cDNA序列如SEQ ID NO：1所示，是由如该序列首尾连接成的环状结构。其在制备膀胱癌的诊断试剂中应用。环状RNA hsa‑circ‑0006332siRNA序列：正义链：GAAACAUGCUGCGACCCUGUU，反义链：CAGGGUCGCAGCAUGUUUCUU。本研究通过合成靶向hsa‑circ‑0006332siRNA序列，转染到膀胱癌细胞中，体外培养系统证实靶向干扰hsa‑circ‑0006332可抑制膀胱癌细胞的增殖，有助于膀胱癌的疾病诊断，有助于抗肿瘤靶向药物的研发，为膀胱癌的治疗提供了新的途径。

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学技术领域，具体涉及一种膀胱癌相关环状RNA的应用和siRNA及其用途。

背景技术

膀胱癌是泌尿系统常见肿瘤，其复发率高，严重影响病人的生存及生活质量。研究表明，膀胱癌的发生发展是多基因、多步骤、多阶段的复杂过程，其中，抑癌基因失活与癌基因激活与之有关。

环状RNA(circular RNA，circRNA)是一种没有3’及5’端的闭环序列，无或部分有编码蛋白的能力，具有耐受核酸酶的消化的特性。环状RNA可通过转录及转录后调控影响基因的表达，并参与机体的生长、发育、死亡等重要生命活动的调控，存在组织特异性。研究表明，环状RNA的差异表达与肿瘤的发生发展密切相关。一些环状RNA在肿瘤诊断、治疗及预后中具有重要意义，可以作为肿瘤的分子标记物。

发明内容

本发明提供了一种膀胱癌相关环状RNA的应用和siRNA及其用途，其中，膀胱癌相关环状RNA为hsa-circ-0006332，hsa-circ-0006332的siRNA为抑制制剂，并提供其用途。

一种膀胱癌相关环状RNA，其circbase ID为hsa-circ-0006332。

一种膀胱癌相关环状RNA，其cDNA序列如SEQ ID NO：1所示，是由如该序列所示的序列首尾连接成的环状结构。

一种环状RNA hsa-circ-0006332，在制备膀胱癌的诊断试剂中的应用。

一种环状RNA hsa-circ-0006332siRNA序列如下：

正义链：GAAACAUGCUGCGACCCUGUU

反义链：CAGGGUCGCAGCAUGUUUCUU

一种环状RNA hsa-circ-0006332siRNA的用途，利用环状RNA hsa-circ-0006332siRNA制备抑制膀胱癌增殖的制剂，所述的抑制膀胱癌增殖的制剂包括环状RNAhsa-circ-0006332的siRNA序列。

所述的抑制膀胱癌增殖的制剂，还包括阴性对照NC(Negative Control)序列：

正义链：UUCUCCGAACGUGUCACGUUU

反义链：ACGUGACACGUUCGGAGAAUU

本发明检测了环状RNA hsa-circ-0006332在离体肿瘤标本中的表达，并分析了环状RNA hsa-circ-0006332的表达水平与临床资料的相关性。其具体手段为：膀胱癌及对应的癌旁正常组织中提取RNA，然后逆转录成cDNA，进行实时定量PCR，检测环状RNA hsa-circ-0006332的表达。结果显示环状RNA hsa-circ-0006332在膀胱癌组织中上调。临床相关性分析显示，环状RNA hsa-circ-0006332与肿瘤侵袭深度及TNM分期有关，因此针对此circRNA的检测制剂可用于疾病早期诊断，有助于临床治疗。