[发明专利]一种利用虾下脚料筛选菌种的方法及该菌种的应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，公开了一种利用虾下脚料筛选菌种的方法及该菌种的应用。本发明以虾下脚料作为唯一底物，将未知菌液与虾下脚料一同发酵培养，将虾下脚料发酵液稀释后涂布到无菌培养基上培养，观察培养后的菌落的形态，选取菌落数量最多的三种形态的菌落，将挑选出的三种菌落分别划线到无菌培养基中进行分离纯化，纯化得到的三种菌株便为降解虾下脚料的优势菌株。本发明通对未知组成成分的混合菌液进行特定菌种的筛选，分离筛选出能高效利用下脚料废物的优势菌种。通过本发明的方法能够将虾下脚料再利用，提取其中的营养物质，避免浪费，同时也避免了环境污染。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种利用虾下脚料筛选菌种的方法及该菌种的应用。

背景技术

海产品内脏是指在海产品加工过程中产生的废料，以及一些边角料，但所含营养成分极其丰富。目前，加工虾的途径会产生大量的虾渣、虾壳、虾头、虾尾等，这些下脚料约占整个虾的20％到50％。虾的废弃物富含营养物质，如蛋白质、不饱和脂肪酸、矿物质、甲壳素和虾青素。甲壳素广泛存在于自然界，是一种纤维状物质，它的含量仅次于纤维素，被称之为“第六生命要素”，稍微加以利用就可以变废为宝，增加效益。传统的方法利用虾壳是用酸碱法提取对虾壳中的甲壳素，此方法会产生大量的废液，对环境是一种污染，也是对虾壳资源的一种浪费。因此需要寻求一种绿色环保的加工方式对虾下脚料进行利用，提高其经济效益，解决虾下脚料大量浪费、污染环境等问题。

中国专利申请公开号为CN104938604B的专利，公开了一种水产加工下脚料综合利用方法。该方法是以鱼、虾、蟹等甲壳动物加工下脚料为原料，通过清洗、低温干燥、冷冻粉碎、复合酶降解、有机酸提取、离心分离、反渗透脱水、分子包埋、高压均质、真空低温冷冻式干燥、制粒、压片、自动瓶装包装生产线、外包装等全套工艺，将水产加工下脚料中所有高附加值的生物活性成分——虾青素、蛋白质、有机钙和甲壳素及其衍生物壳聚糖等一并提取出来。但该方法操作复杂，用水量大，浪费水资源。同时，该发明中的地下无动力生态污水处理系统深埋在地底深处，施工难度大。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种利用虾下脚料筛选菌种的方法及该菌种的应用。本发明对虾下脚料废弃物进行再加工，结合微生物发酵作用，对其回收，提取其营养物质。本发明以虾下脚料作为唯一底物，对未知组成成分的混合菌液进行特定菌种的筛选，分离筛选出能高效利用下脚料废物的优势菌种。能够将虾下脚料废弃物再利用，提取其中的营养物质，避免浪费，同时也避免了环境污染。

本发明的具体技术方案为：一种利用虾下脚料筛选菌种的方法，包括以下步骤：

(1)无菌环境下，将无菌的虾下脚料、无菌水和混合菌液一起发酵培养，得虾下脚料发酵液；

(2)无菌条件下，将虾下脚料发酵液用无菌水进行梯度稀释，将稀释后的虾下脚料发酵液涂布在无菌培养基中培养至有明显的菌落生长；

(3)无菌条件下，挑取数量最多的三种不同形态的菌落，依次命名为X1、X2、X3，每种形态的单菌落分别划线在不同的无菌培养基中培养至有明显的菌落生长；

(4)无菌条件下，将经步骤(3)培养的分别划线有X1、X2、X3的培养基中X1、X2、X3的单菌落再次划线到无菌培养基中培养；重复划线至少3次，最后得到的菌种即为分离纯化后的菌种X1、X2、X3。

本发明以虾下脚料作为唯一底物，将未知菌液与虾下脚料一同发酵培养，将虾下脚料发酵液稀释后涂布到无菌培养基上培养，观察培养后的菌落的形态，选取菌落数量最多的三种形态的菌落，将挑选出的三种菌落分别划线到无菌培养基中进行分离纯化，纯化得到的三种菌株便为降解虾下脚料的优势菌株。本发明通对未知组成成分的混合菌液进行特定菌种的筛选，分离筛选出能高效利用下脚料废物的优势菌种。通过本发明的方法能够将虾下脚料废弃物再利用，提取其中的营养物质，避免浪费，同时也避免了环境污染。