[发明专利]琥珀酸酐改性玉米醇溶蛋白载药颗粒的制备方法

说明书

本发明公开了琥珀酸酐改性玉米醇溶蛋白载药颗粒的制备方法。该方法是将玉米醇溶蛋白溶于二甲基亚砜或者乙醇水溶液中，调节溶液pH至10～11，再与琥珀酸酐混合，在40～45℃温度下反应1～2h，反应过程中保持溶液pH为碱性，得到琥珀酰化玉米醇溶蛋白液，反应结束后置于透析袋中透析、冷冻干燥成粉末状固体，将疏水性药物与冻干的琥珀酰化玉米醇溶蛋白溶于乙醇水溶液；搅拌下注入盐酸水溶液中，稳定后离心去上清，得载药颗粒。本发明所制备的载药球形度高，分散性好，载药颗粒粒径分布窄，大小均一，在生理pH环境下稳定性较未改性玉米醇溶蛋白颗粒显著提升，缓释效果好，可用于口服、吸入式给药或制备成混悬剂供注射使用。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种琥珀酸酐改性玉米醇溶蛋白，及琥珀酰化玉米醇溶蛋白载药颗粒的制备方法。

背景技术

水溶性差是限制许多传统化疗小分子药物在临床应用的主要问题之一。近年来，以纳米技术为基础的药物输送系统为克服药物水溶性差，改善疏水性药物在生物体内的药代动力学提供了一个新的策略；纳米药物输送系统通过药物载体实现给药过程，具有缓释、控释和靶向释放等优点。作为药物输送系统的重要组成部分，药物载体材料的选择极其关键，要求载体材料具有良好的生物相容性和生物可降解性，且不影响药物的药理作用。姜黄素、吲哚美辛及羟基喜树碱这几类药物为疏水性药物，常用的给药方式为静脉注射，在治疗过程中，存在体内药物浓度过高、吸收性差会导致严重副反应的特点；目前这几类药物输送系统所用的材料主要是聚乳酸等合成高分子和亲水性天然大分子，前者不利于在生物体内的降解和吸收,后者不利于药物的持续释放。玉米醇溶蛋白(全称玉米醇溶贮藏蛋白)作为一种疏水性天然植物大分子，来源广泛，无毒，非免疫原性，且具有良好的生物相容性及生物可降解性，是少数被FDA允许口服的疏水性生物高分子(Irache J M,Gonzáleznavarro CJ.Zein nanoparticles as vehicles for oral delivery purposes.Nanomedicine,2017,12(11):1209‐1211.)。

玉米醇溶蛋白的氨基酸组成较为独特，非极性氨基酸的比例超过50％。在其组成的影响下，玉米醇溶蛋白能在一定条件下自组装形成稳定的内“疏”外“亲”的密实结构，包埋各种物质，如多糖、基因片段、蛋白质、金属纳米颗粒、量子点、疏水性药物等。再者，玉米醇溶蛋白分子链上带有大量可反应的官能团(如‐SH、‐COOH、‐NH₂以及‐OH)。玉米醇溶蛋白可根据这些基团为化学反应位点有针对性地修饰改性，为其适应复杂多变的人体环境提供可能性。因此，无论从来源，成本，安全性，还是从其本身的理化性质、应用拓展性等方面进行考量，玉米醇溶蛋白都是一个优势的药物载体材料。

玉米醇溶蛋白作为一种醇溶性蛋白，可通过相分离法快速形成小球，该法得到的产品粒径较大，分布宽，且产品在生理条件下Zeta电位绝对值小，容易团聚沉淀，导致药物过早释放或释放不出来，影响药物在体内的释放和传递，在药物输送上的应用有很大局限性(Shukla R,Cheryan M.Zein:the industrial protein from corn.Industrial Crops&Products,2001,13(3):171‐192.)，研究人员经常使用分散剂来改善玉米蛋白的分散性，不仅影响了药物分子的理化性质和生物利用度，也存在着溶剂残留等问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的问题，有效避免玉米蛋白载药颗粒分散过程中易发生聚集，药物释放过快等问题，提供一种载药效率高，分散性好，大小均匀，在生理条件下，等电点位于pH 4.5～5，Zeta电位达到‐32.4～‐49.5mV，释放50％质量药物的时间大于48h，尤其适用于负载姜黄素、吲哚美辛或羟基喜树碱等疏水性药物的琥珀酸酐改性玉米醇溶蛋白颗粒的制备方法。

本发明目的通过如下技术方案实现：

琥珀酸酐改性玉米醇溶蛋白载药颗粒的制备方法，包括如下步骤：