[发明专利]抗体、偶联物及其制备方法和用途

说明书

本申请涉及新的靶向Trop‑2的人源化抗体，以及由其制备的抗体‑药物偶联物，盐或立体异构体，盐或立体异构体的溶剂合物。同时，本申请还涉及由抗体‑药物偶联物，盐或立体异构体，盐或立体异构体的溶剂合物制备的药物组合物，药物制剂。此外，本申请的抗体‑药物偶联物或者其药学上可接受的盐或立体异构体或者溶剂合物，本申请的药物组合物或药物制剂可用于制备用于抑制癌细胞生长、增殖或迁移，预防或治疗癌症的组合物。

发明领域

本申请属于生物技术领域，涉及生物活性抗体，其片段、衍生物和偶联物，及其在预防和/或治疗与细胞活动异常相关的疾病，包括但不限于在预防和/或治疗肿瘤疾病中的用途。

发明背景

化疗一度是癌症的标准疗法，但高杀伤力的生物活性分子会误杀正常细胞，引起严重的副作用。靶向抗肿瘤药物由于同时具有靶向性和抗肿瘤活性，已成为当今肿瘤研究领域的热点。20世纪以来，生物大分子药物(例如治疗性抗体或抗体片段)和靶向小分子配体用于抗肿瘤药物的开发及肿瘤靶向治疗已取得突破性进展。然而，生物大分子药物虽然靶向性强，但对实体瘤的治疗效果有限；而生物活性分子虽然对癌细胞具有高度的杀伤效力，但往往缺乏靶向性，常常误伤正常细胞，从而引起严重毒副作用。

近年来研究发现，治疗性抗体可以与生物活性分子相连，形成抗体-药物偶联物(ADC)。

抗体是良好的药物靶向性载体。利用药物分子中的特定官能团如羟基、巯基或氨基，可将药物与抗体连接，组成抗体-药物偶联物。抗体的靶向性能将与之相连的药物“精确”地运送到靶细胞，从而有效提高病灶局部的药物浓度，同时极大地降低体内其他组织、器官的药物浓度，从而实现增效减毒。用于这些策略的多克隆抗体和单克隆抗体均已有报导(Rowland等人，1986，Cancer Immunol.Immunother.，21：183-87)。目前临床上所用的ADC中的抗体大多是人源化抗体，例如，PSMA ADC(抗PSMA抗体-MMAE偶联物)、SGN-75(抗CD70抗体-MMAF偶联物)、T-DM1(曲妥珠单抗-DM1偶联物)中所用均为人源化抗体。

ADC融合了抗体的靶向作用和生物活性分子的活性，成为一种“生物导弹”。抗体引导ADC结合到靶细胞，随后被细胞内化，释放药物，治疗疾病。由于抗体对肿瘤细胞相关靶点具有特异性和靶向性，其应用价值不仅体现在治疗方面，同时还成为药物靶向输送的理想载体，降低了药物的副作用。

ADC中作为“弹头”的药物通常为细胞毒性药物，即小分子毒素，它们主要通过抑制细胞DNA或蛋白质合成、抑制细胞有丝分裂等方式来杀伤肿瘤细胞。

由于细胞毒性药物对正常细胞同样具有较大杀伤力，因而其应用和发展受到极大限制。早期的ADC利用常规抗肿瘤药物，但这些ADC临床活性大多低于化学药单体的体外活性。目前的ADC所用的细胞毒性药物主要包括：美登素类(Maytansinoids，参见例如EP0425235、US 5208020、US 5416064、US 7276497、US 7473796、US 7851432、US 2007/0269447、US 2011/0158991、WO 2004/103272、WO 2012/061590)、耳抑素肽类(Auristatins，参见例如US 6884869、US 7498298)、卡奇霉素类(Calicheamicins，参见例如US 5606040、US 5770710)、阿霉素类(Doxorubicins，参见例如Dubowchik等人，2002，Bioconjugate Chem.，13：855-869)、苯并二吡咯类抗生素(duocarmycins和CC-1065，参见例如US 7129261)、伊立替康代谢产物(Irinotecan metabolites，参见例如WO 2015/012904)、吡咯并苯二氮卓类(Pyrrolobenzodiazepines，参见例如Biotechnol.Healthc.2012Winter，9(4)：28-31)以及吡咯并苯二氮卓二聚体类(PBDdimmers，参见例如WO 2005/040170)等。这些细胞毒性药物具有很强的非选择性毒性，会对正常细胞造成伤害，因而本身不能成药。