[发明专利]对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的PCR检测引物及检测方法在审
申请号: | 201811075206.5 | 申请日: | 2018-09-14 |
公开(公告)号: | CN109022622A | 公开(公告)日: | 2018-12-18 |
发明(设计)人: | 李云;刘红;唐芳;温贝妮;朱其建;戴习林 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
代理公司: | 南京业腾知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32321 | 代理人: | 李静 |
地址: | 201306 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 传染性皮下及造血组织坏死病毒 引物设计 引物 对虾 甲壳动物 变异位点 病原检测 核苷酸序 上游引物 我国对虾 下游引物 育苗过程 早期预警 避开 检测 养殖 群体 应用 | ||
1.一种对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的PCR检测引物,其特征在于,所述引物由上游引物和下游引物组成,其核苷酸序列为:
上游引物:5'-AATTTCTCCAAGCCTTCTCACC-3'
下游引物:5'-TCTGGCAGCAAAGGTAACTCC-3'。
2.一种对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒的PCR检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)提取待测样品的基因组DNA;
(2)采用权利要求1所述引物对待测样品的基因组DNA进行PCR扩增反应,得到PCR扩增产物;
(3)将步骤(2)的PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,根据电泳结果判断样品中是否含对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒。
3.如权利要求2所述的PCR检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述PCR扩增反应的反应体系为20μL,包括2×Taq PCR Master Mix 10μL,上游引物、下游引物各0.5μL,ddH2O 8.5μL,DNA模板0.5μL。
4.如权利要求2所述的PCR检测方法,其特征在于,步骤(2)中,所述PCR扩增反应的程序为:94℃3min;94℃1min,68℃1min,72℃1min,35个循环;72℃10min。
5.如权利要求2或3或4所述的PCR检测方法,其特征在于,步骤(3)中,琼脂糖凝胶电泳的琼脂糖浓度为1.5%,电压为70V。
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