[发明专利]一种新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺在审
| 申请号： | 201811080621.X | 申请日： | 2018-09-17 |
| 公开（公告）号： | CN109097318A | 公开（公告）日： | 2018-12-28 |
| 发明（设计）人： | 李京培;李群;李恺悦;许方玮;牛瑞琪;桂思语;陈一铭;尤宇星 | 申请（专利权）人： | 安徽医科大学 |
| 主分类号： | C12N3/00 | 分类号： | C12N3/00;C12R1/01 |
| 代理公司： | 安徽合肥华信知识产权代理有限公司 34112 | 代理人： | 余成俊 |
| 地址： | 230032*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 新型隐球菌 体外培养 荚膜 制作工艺 厚壁 医学实验教学 人体机体 保藏 促生长 示教 小鼠 体内 | ||
【权利要求书】：
1.一种新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺，其特征在于，包括以下步骤：
（1）利用已知新型隐球菌在相对应的沙氏培养基平皿上接菌，四区分离划线，放置于37℃恒温培养箱中培养2天，形成单个菌落，再挑取大的单菌落接菌到血平皿上，放置于37℃恒温培养箱中培养2天，形成单个菌落；
（2）挑取一个菌落至1ml生理盐水里充分混匀，其菌悬液浓度相当于5×108CFU/ml；
（3）将步骤2所得菌液50μl加入到含有0.4ml促荚膜生长液的1.5mlEP管内，混匀，放入37℃恒温培养箱中培养5-7天，拿出EP管；
（4）在洁净的载玻片上用加样器取25μl步骤3所得培养液与25μl墨汁染色液混合，盖上盖玻片，得到培养形成的新型隐球菌厚壁荚膜。
2.根据权利要求1所述的新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺，其特征在于，所述步骤3中促荚膜生长液为小牛血清和DMEM液等体积混合液。
3.根据权利要求1所述的新型隐球菌体外培养荚膜的方法的制作工艺，其特征在于，所述新型隐球菌体外培养形成厚壁荚膜的保藏方法为，在培养形成的新型隐球菌厚壁荚膜，在其菌液里加入0.1-0.2ml无菌甘油，放于4℃冰箱内可保藏3年。
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