[发明专利]一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：包括由碳酸钙中的钙离子与阿霉素螯合形成的阿霉素钙复合物，所述阿霉素钙复合物的表面上连接有蚕丝蛋白；

所述纳米粒由如下方法制备：

(1)制备蚕丝蛋白液

将蚕茧在0.02M碳酸钠溶液中煮沸1h，然后换新鲜碳酸钠溶液再次煮沸1h，随后将蚕茧浸泡在去离子水中，中间换水4-5次，以洗掉蚕茧表面的丝胶蛋白；然后将脱胶的蚕丝蛋白溶解于60℃的9.2M溴化锂溶液里，5h后转移至去离子水中透析3天，去除杂质及其他离子，最后过滤收集蚕丝蛋白液，冷冻干燥备用；

(2)制备纳米粒

先将5mg阿霉素溶解于0.5ml去离子水中，取10mg冷冻干燥的蚕丝蛋白溶解于4ml去离子水中，将200mg二水氯化钙溶解于100ml无水乙醇中，随后向上述乙醇溶液中加入事先已溶解的5mg阿霉素，搅拌均匀，然后再向乙醇溶液中缓慢加入已溶解的蚕丝蛋白液，再搅拌均匀；接着，将装有上述混合液的烧杯放入真空干燥箱内，烧杯周围摆放若干装有碳酸氢铵的玻璃皿，将烧杯及玻璃皿均覆盖上锡箔纸，并扎若干小孔，在密闭环境内反应2天后，将烧杯中的混合液离心，润洗，收集沉淀，得到纳米粒。

2.根据权利要求1所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：外形呈球形，粒径为182±5nm。

3.根据权利要求2所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：pH为7.4时，纳米粒的电位为-10.1mV。

4.根据权利要求2所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：pH为6.5时，纳米粒的电位为-12.9mV。

5.根据权利要求2所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：pH为5.5时，纳米粒的电位为-21.2mV。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：阿霉素的载药量为7.4％，包封率为92.13％。

7.根据权利要求6所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：溶于蒸馏水时，在545nm和585nm处分别具有特征性紫外-可见光吸收谱波峰。

8.根据权利要求6所述的一种溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒，其特征在于：溶于稀盐酸时，在475nm和495nm处分别具有特征性紫外-可见光吸收谱波峰。

9.根据权利要求5所述的溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)制备蚕丝蛋白液

将蚕茧在0.02M碳酸钠溶液中煮沸1h，然后换新鲜碳酸钠溶液再次煮沸1h，随后将蚕茧浸泡在去离子水中，中间换水4-5次，以洗掉蚕茧表面的丝胶蛋白；然后将脱胶的蚕丝蛋白溶解于60℃的9.2M溴化锂溶液里，5h后转移至去离子水中透析3天，去除杂质及其他离子，最后过滤收集蚕丝蛋白液，冷冻干燥备用；

(2)制备纳米粒

先将5mg阿霉素溶解于0.5ml去离子水中，取10mg冷冻干燥的蚕丝蛋白溶解于4ml去离子水中，将200mg二水氯化钙溶解于100ml无水乙醇中，随后向上述乙醇溶液中加入事先已溶解的5mg阿霉素，磁搅拌2h，然后再向乙醇溶液中缓慢加入已溶解的蚕丝蛋白液，再搅拌0.5h；接着，将装有上述混合液的烧杯放入真空干燥箱内，烧杯周围摆放若干装有碳酸氢铵的玻璃皿，将烧杯及玻璃皿均覆盖上锡箔纸，并扎若干小孔，在密闭环境内反应2天后，将烧杯中的混合液8000rpm离心5min，润洗，收集沉淀，得到纳米粒。

10.根据权利要求6所述的溶酶体靶向的pH敏感性纳米粒在用于制备抗癌药物中的应用。