[发明专利]一种润肠通便中药的HPLC指纹图谱检测方法

说明书

本发明公开了一种润肠通便中药的指纹图谱检测方法，本发明对测定指纹图谱的仪器、色谱柱、供试品溶液制备方法、流动相、检测波长等条件进行了摸索，建立了液相指纹图谱测定条件并进行了方法学考察，根据多批大生产样品制定了该中药的标准指纹图谱，在生产过程中可有效的指导投料、严格规范生产操作，真正确保了临床用药的安全、有效、可靠，与其它检测方法相比具有操作方便、快捷等优点。

技术领域

本发明属于中药检测领域，涉及一种润肠通便中药的HPLC指纹图谱检测方法。

背景技术

指纹图谱是一种可量化的检测中药材及中药制剂的方法，主要用于鉴别真伪和评价原药材、半成品及制剂质量的均一性和稳定性。与指标成分含量测定的质量分析方法相比，指纹图谱能够比较全面地反映中药化学成分的种类和数量，在中药复方制剂有效成分尚未完全阐明的现状下，可实现对中药内在质量的综合评价和对其整体物质的有效控制，是目前中药及其制剂质量控制的最有效手段。中药指纹图谱的检测方法有色谱法、光谱法、波谱法等。色谱法主要包括薄层色谱、高效液相色谱、气相色谱、毛细管电泳等，其中高效液相色谱法具有高效、快速、灵敏、重现性好的特点，现已成为中药指纹图谱研究的主流方法。

枳术润肠颗粒是健民药业集团股份有限公司研发的中药六类新药，本品由枳实、白术、决明子、苦杏仁四味中药材制成，制备方法主要包括药材加水煎煮提取、醇沉、加入辅料制粒成型等步骤。目前针对该类润肠通便中药复方制剂的质量控制普遍采用的是对单一成分进行定性或定量，难以全面、有效地控制产品质量，从而无法保证疗效。

发明内容

本发明的目的是为了全面、有效地控制产品质量，建立一种润肠通便的HPLC指纹图谱检测方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术手段：

一种润肠通便中药的HPLC指纹图谱检测方法，所述润肠通便中药由以下重量份数的成分组成：枳实15-30份、白术50-100份、决明子15-30份、苦杏仁10-20份，该检测方法包括以下步骤：

(1)将中药研细后用有机溶剂提取，将得到的提取物上层析柱，用水作洗脱剂进行色谱分离，收集洗脱液并配制成供试品溶液；

(2)精密吸取供试品溶液，上高效液相色谱仪进行检测，所述高效液相色谱仪含有紫外检测器，所述紫外检测器的设定检测波长为250-300nm，所述高效液相色谱仪的固定相为C₁₈色谱柱，流动相为乙腈和缓冲盐的混合溶液，采用梯度洗脱，流速为0.5-2ml/min，柱温为25～35℃，理论板数不低于4000；

(3)记录供试品溶液的色谱图，利用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统，将色谱图分别经过数据导入、多点矫正和数据匹配，即得标准指纹图谱并将标准指纹图谱与待测样品的指纹图谱进行相似度分析。

优选地，所述有机溶剂为40-90％(体积)甲醇，优选50％甲醇。

优选地，所述提取为超声提取。

优选地，所述层析柱为聚酰胺柱。

优选地，所述紫外检测器的设定检测波长为280nm。

优选地，所述梯度洗脱中，各时间段及流动相中缓冲盐相所占的体积比分别为： 0～7min，缓冲盐相92％；7～20min，缓冲盐相92～80％；20～36min，缓冲盐相80％；36～55min，缓冲盐相80～52％；55～70min，缓冲盐相52～38％。

优选地，所述缓冲盐为：磷酸二氢钾0.8g，十二烷基磺酸钠1.0g，冰乙酸1ml，加水溶解并稀释至1000ml，PH为3.0。

优选地，所述指纹图谱中有14个特征峰，经过与对照品图谱对比，其中1号峰为辛弗林、9号峰为橙黄决明素。

本发明的有益效果是：