[发明专利]抗人IgG单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及应用

说明书

本发明涉及杂交瘤细胞株及其所分泌的单克隆抗体，所述抗体能与人IgG特异性结合。本发明还涉及包括所述杂交瘤细胞株或单克隆抗体的试剂盒。本发明的单克隆抗体在抗体纯度、可重复性、抗体效价和稳定性方面均展现出很好的性能。

技术领域

本发明涉及一种单克隆抗体，特别涉及一种抗人IgG的单克隆抗体，分泌所述单克隆抗体的杂交瘤细胞，以及所述单克隆抗体的应用。

背景技术

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus，HCMV)可通过口腔、生殖道、胎盘、授乳以及输血或器官移植等多途径传播。人群感染HCMV的显著特点是感染率高，正常成人HCMV抗体阳性率为76.7％－95.8％，我国也是HCMV感染高度流行国家之一。

HCMV初次感染可无明显症状，但病毒从此长期潜伏体内。当机体免疫功能低下时，潜伏病毒开始复制并大量增殖，继发活动性感染并表现多种临床症状。HCMV感染是导致出生缺陷的重要因素之一，并且有研究显示HCMV感染与糖尿病、动脉粥样硬化及一些恶性肿的发病密切相关。在恶性肿瘤、艾滋病、器官移植等免疫功能减弱或受抑制的患者HCMV的活动性感染常并发间质性肺炎、视网膜炎、食管炎、结肠炎和脑膜脑炎等多器官脏器损害的各种临床综合征，是患者致死或移植术失败的重要原因。

检测IgG抗体了解人群感染率，对HCMV相关疾病的预防、管理控制及相关政策的制定具有重要意义。而明确个体HCMV已感染状态则利于临床确定个体治疗方案，如AIDS及器官移植术患者，需要检测HCMV IgG抗体，从而确定是否需要跟踪其IgG抗体水平，以便及时抗HCMV治疗。所以HCMV IgG抗体的检测虽然只能代表曾感染、体内潜伏有HCMV，并非病毒活动性感染的指证，但是仍然具有市场需求。目前市售检测HCMV IgG抗体的试剂多以HCMV全病毒裂解物作为包被抗原，其抗原成分复杂且潜在宿主细胞蛋白污染的可能，也潜在结合疱疹病毒科其他病毒抗体产生假阳性信号的可能，并且试剂的制作过程因需要培养病毒而操作繁琐。少数HCMV IgG抗体检测试剂则以HCMV的重组蛋白为包被抗原，这种试剂制作经济简便但是试剂的稳定性较差，敏感性和特异性也有待提高，而进口的此类试剂价格过高。因此研发出经系统性评价结果较好的抗人IgG单克隆抗体在体外诊断试剂领域具有非常广泛的应用。

然而，筛选用于制备体外诊断试剂的单克隆抗体是一个复杂的过程，首先要获得很好的抗原，来制备足够多的抗体，然后对抗体进行系统的评价，获得具有临床相关性的候选抗体，再开发成检测试剂。其中，抗体效价、交叉反应性、稳定性和临床效果等均是重要的评价因素，如抗体效价高低反映了一定浓度下与抗原反应的最低滴度，滴度越低效价越高；抗体交叉反应性可影响该抗体的特异性；抗体的稳定性会直接影响最终结果的可靠性，而稳定性较差的抗体对保存条件、操作条件要求更高，从而降低了其作为诊断试剂的实用性及结果的可靠性，并不可避免地引起成本的上升；临床试验则用来说明抗体在诊断相应疾病或病毒感染时的实际效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗人IgG单克隆抗体、分泌该抗体的杂交瘤细胞株、含上述单克隆抗体或杂交瘤细胞株的试剂盒以及它们在检测HCMV IgG中的用途。通过系统性评价，所述抗体在各方面均有较佳表现，从而适合作为免疫诊断试剂用于制备体外诊断试剂盒。

为此，本发明人进行了大量研究，通过人IgG来免疫小鼠，细胞融合后经有限稀释法克隆至少4次，直到达到单克隆，从得到的众多克隆中筛选到1株能稳定分泌抗体的新型杂交瘤细胞株(Hybridoma)，此杂交瘤细胞株记作杂交瘤细胞株1C5，并于2018年8月23日将其保藏于中国典型培养物保藏中心，中国.武汉.武汉大学，保藏编号为CCTCC NO:C2018176，从而完成了本发明。

在第一个方面，本发明提供了一种杂交瘤细胞株，其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2018176。

在第二个方面，本发明提供了一种单克隆抗体，所述单克隆抗体能够与人IgG特异性结合。