[发明专利]一种液质联用检测唾液中司来吉兰及其代谢物的方法

说明书

本发明属于药物分析学领域，涉及一种液质联用检测方法，特别涉及一种唾液中司来吉兰及其代谢物去甲司来吉兰、R‑甲基苯丙胺、R‑苯丙胺的液质联用检测方法。本发明的检测方法中，高效液相色谱采用手性色谱柱分析，甲醇、冰醋酸、氨水为流动相，等度洗脱；根据样品的保留时间、质谱信息进行定性分析，根据其峰面积与内标峰面积比值进行定量分析。本发明所述液质联用检测方法具有高速、灵敏、重现性好等优点。

技术领域

本发明属于药物分析学领域，涉及一种液质联用检测方法，具体涉及一种液质联用检测唾液中司来吉兰及其代谢物的方法，特别涉及唾液中司来吉兰及其代谢物去甲司来吉兰、R-甲基苯丙胺、R-苯丙胺的液质联用检测方法。

背景技术

现有技术公开了司来吉兰为单胺氧化酶B抑制剂，通常临床实践中用于治疗帕金森综合征及其他神经失调症。研究显示，司来吉兰在肝脏中主要经P450酶代谢为去甲司来吉兰，R-甲基苯丙胺和R-苯丙胺，有研究报道公开了有关血液、尿液等生物样本中司来吉兰及其代谢物的检测方法，包括液相色谱法、液质联用、气质联用等；实践显示，上述有关血液、尿液等生物样本中司来吉兰及其代谢物的检测方法在某些特定情况尚不能满足现场检测的需要。迄今，尚未见有从唾液中检测司来吉兰及其代谢物的方法的报道。唾液样本获取方便且无创，在法庭科学和临床应用中常作为血液和尿液的替代检测方法；液质联用技术具有高效液相色谱的分离能力，又具备质谱的高灵敏度和高专属性的检测特点，可一定程度解决生物样本中药物浓度低、内源性干扰物质多的问题。

基于现有技术的现状，本申请的发明人拟提供一种取材方便且快速、准确的液质联用检测唾液中司来吉兰及其代谢物的方法，尤其是基于液质联用的唾液样品中检测司来吉兰及其代谢物去甲司来吉兰、R-甲基苯丙胺、R-苯丙胺的方法，本方法能为相关临床研究提供新的可靠分析手段。

发明内容

本发明的目的在于基于现有技术的现状及缺陷，提供一种液质联用检测唾液中司来吉兰及其代谢物的方法，尤其是唾液中司来吉兰及其代谢物去甲司来吉兰、R-甲基苯丙胺、R-苯丙胺的液质联用检测方法；该检测方法取材方便，快速、准确、灵敏度高。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

本发明的检测方法，以高效液相二级质谱仪为检测仪器，高效液相色谱采用手性色谱柱分析，甲醇、冰醋酸、氨水为流动相，等度洗脱；质谱条件为正离子模式(ESI⁺)，离子源温度500℃，源喷射电压5500V，188.0→91.0/119.0、174.0→91.0/119.0、150.0→91.0/119.0、136.0→91.0/119.0作为定量/定性离子对。采用内标物为4-苯基丁胺的内标法，检测唾液为待测物中司来吉兰及其代谢物的药物浓度替代作为血液和尿液的所述唾液样本获取方便且无创，在法庭科学和临床应用中常，唾液中药物浓度与血液中具有一定相关性，能反映药物在体内的情况；

更具体的，本发明的一种唾液中司来吉兰及其代谢物的液质联用检测方法，其包括：

以高效液相二级质谱仪为检测仪器，高效液相色谱采用手性色谱柱分析，色谱柱为万古霉素键合相，5μm粒径，2.1×250mm规格；流动相为V(甲醇)∶V(冰醋酸)∶V(氨水)＝1000∶1∶0.2，等度洗脱，流速为0.33ml/min，柱温25℃；质谱条件为离子源温度为500℃，源喷射电压为5500V，气帘气25psi，离子源气1为45psi，离子源气2为45psi；选择两对离子对188.0→91.0/119.0，174.0→91.0/119.0，150.0→91.0/119.0，136.0→91.0/119.0分别对司来吉兰、去甲司来吉兰、R-甲基苯丙胺、R-苯丙胺进行定性，其中188.0→91.0，174.0→91.0，150.0→91.0，136.0→91.0作为定量离子对；

本发明中，所述司来吉兰其代谢物为去甲司来吉兰、R-甲基苯丙胺、R-苯丙胺；