[发明专利]用于评价质谱成像制备质量的方法及其套件

权利要求书

1.一种评价用于质谱成像的分析组织切片的制备质量的方法，包括：

-提供适用于质谱成像的样品支持物；

-将所述分析组织切片和参考样品置于所述样品支持物上，其中所述参考样品包括具有相邻的第一类型的生物材料区域和第二类型的生物材料区域的组织，所述第一类型的生物材料的特征为第一质量信号曲线；

-共同制备用于分析的所述分析组织切片和所述参考样品，其包括将所述分析组织切片和所述参考样品暴露于湿化学品；

-在同一测量运行中获取来自所述分析组织切片和所述参考样品的空间分辨质谱；

-在来自所述参考样品的空间分辨质谱上对所述第一质量信号曲线进行强度追踪；

-从一个或多个强度轨迹中推断分析物移位特征，其中所述分析物移位特征表示在湿化学条件下样品的制备和处理期间可能已经发生的目标分析物的扩散；以及

-使用所述分析物移位特征标记由所述分析组织切片的所述空间分辨质谱所产生的质谱图像。

2.根据权利要求1所述的方法，还包括使用以下至少一者作为所述参考样品：结肠圈切片、睾丸切片、脾脏切片、皮肤切片、血管、脊椎切片和来自含有培养的细胞层的组织替代物的切片。

3.根据权利要求1所述的方法，还包括在所述空间分辨质谱上对作为所述第二类型的生物材料特征的第二质量信号曲线进行强度追踪，并且使用不同的强度轨迹，分别通过其第一质量信号曲线和第二质量信号曲线，从来自所述参考样品的空间分辨质谱中找到属于所述第一类型的生物材料或所述第二类型的生物材料的采集数据，从而确定所述参考样品上相应的独立区域，以及找到特征为所述第一质量信号曲线和第二质量信号曲线的混合的采集数据，从而确定所述参考样品上的重叠区域。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述推断包括计算所述独立区域中质谱的数量以及所述重叠区域中质谱的数量，并生成所述独立区域中质谱的数量和所述重叠区域中质谱的数量的比值作为所述分析物移位特征。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一质量信号曲线的一个或多个强度轨迹与所述参考样品中的薄的细长结构相交，并且推断所述分析物移位特征包括使用拟合算法。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述拟合算法采用分析曲线并考虑所述薄的细长结构的有限宽度。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述分析曲线为高斯钟形曲线。

8.根据权利要求5所述的方法，其中所述薄的细长结构包括肌层和基底层中的一者。

9.根据权利要求1所述的方法，还包括从强度追踪步骤和推断步骤中掩蔽所述空间分辨质谱的非组织采集。

10.根据权利要求9所述的方法，其中通过使用所述参考样品的光学图像并将其与来自所述参考样品的空间分辨质谱相匹配来确定待掩蔽的非组织采集。

11.根据权利要求1所述的方法，还包括使用包埋入有机固体材料中的化学固定的样品作为所述分析组织切片和所述参考样品。

12.根据权利要求11所述的方法，其中将FFPE样品用作所述分析组织切片和所述参考样品。

13.根据权利要求11所述的方法，其中共同制备用于分析的所述分析组织切片和所述参考样品包括对所述包埋入有机固体材料中的化学固定的样品进行抗原修复，以促进其中的解交联。

14.根据权利要求1所述的方法，其中共同制备用于分析的所述分析组织切片和所述参考样品包括对所述分析组织切片和所述参考样品进行基本上保持空间分布的酶促消化。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述酶促消化为胰蛋白酶消化或聚糖消化。