[发明专利]一种鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗及其制备方法

说明书

本发明提供的一种鸡传染性法氏囊基因工程亚单位疫苗，由鸡IFN‑α和鸡IL‑2基因的真核共表达产物、鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的原核表达产物和铝胶佐剂组成，其目的是解决现有技术中因VP2基因工程亚单位疫苗免疫效力低、难以临床使用和推广的问题。

技术领域

本发明涉及基因工程亚单位疫苗领域，尤其是涉及一种鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗，具体的是涉及一种鸡白介素-2和鸡α干扰素共表达产物提高鸡法氏囊VP2亚单位疫苗。

背景技术

基因工程亚单位疫苗是现代基因工程技术的成果结晶，凭借其无可比拟的高安全性、稳定性和低生产成本，使其成为现代疫苗制备领域的宠儿，但是由于其抗原的免疫原性差这一先天不足导致其不可能完全取缔传统疫苗。因此，如何提升基因工程亚单位疫苗抗原的免疫原性或者提升其免疫效力成为近年来的研究焦点。利用具有免疫调节和免疫效应功能的细胞因子作为免疫增强剂，用于提升基因工程亚单位疫苗的免疫效力，已经被越来越多的研究所证实。

α干扰素(Interferon-α，IFN-α)具有广谱的抗病毒、抗肿瘤和免疫激活功能活性，增强机体细胞免疫应答水平；白细胞介素-2(Interleukin-2，IL-2)可以促进T、B淋巴细胞的分化与增殖，提高机体的细胞和体液免疫应答水平，将IFN-α和IL-2联合应用可发挥协同抗病毒活性。程俊贞等已研究证实联合重组表达的IFN-α和IL-2对新城疫病毒灭活疫苗具有显著的免疫增强作用。

鸡传染法氏囊VP2亚单位疫苗制备技术业已成熟，但是其免疫效力远低于传统疫苗，严重制约了VP2亚单位疫苗的应用和推广。利用单一的IFN-α和IL-2作为免疫增强剂，或将其基因与VP2蛋白基因串联表达共同制备成抗原，以期提升VP2亚单位疫苗的免疫效力已被报道，但是其实际的临床效果不甚理想。本发明在上述研究的基础上，创造性的利用IFN-α和IL-2共表达技术获得真核表达产物，与原核表达的VP2蛋白混合制备成抗原，进一步制备成抗体，在临床中取得了显著的免疫效力提升效果。

发明内容

本发明的技术目的在于提供一种高免疫效力的鸡传染法氏囊VP2亚单位疫苗，以解决现有技术中因VP2亚单位疫苗免疫效力低、难以临床使用和推广的问题。

本发明的另一技术目的在于克服传统疫苗存在免疫空白期、一次免疫难以解决法氏囊病度持续感染、病程中因病毒变异导致的免疫失败等问题。

本发明的技术目的还在于提供一种鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗的制备方法。

为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

一种鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗，由鸡IFN-α和鸡IL-2基因的真核共表达产物、鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的原核表达产物和铝胶佐剂组成。

更进一步的，鸡IFN-α和鸡IL-2基因上分别连接有HBM信号肽基因，分别命名为HBM-ChIFNα和HBM-ChIL2；

更进一步的，鸡IFN-α和鸡IL-2基因的表达载体是pFastBacDual载体；

更进一步的，与载体连接的HBM-ChIFNα和HBM-ChIL2基因分别由pFastBacDual载体的PH和P10启动子控制。

更进一步的，真核表达系统是Bac-to-Bac杆状病毒表达系统。

一种鸡传染性法氏囊病亚单位疫苗的制备方法，包括以下步骤：

1)将鸡IFN-α和鸡IL-2真核共表达产物与VP2原核表达产物混合均匀制备成抗原；

2)将抗原与铝胶佐剂混合均匀制备成亚单位疫苗。

更进一步的，抗原中鸡IFN-α和鸡IL-2真核共表达产物的终浓度为500-800ng/ml。