[发明专利]一种鹅痛风病卵黄抗体的制备方法

说明书

一种鹅痛风病卵黄抗体的制备方法。本发明从临床感染的雏鹅病变肝脏及肾脏中分离得到鹅星状病毒RPVA1061株，利用RPVA1061株制备成卵黄抗体用于临床雏鹅痛风病的防治，在解决现有临床鹅痛风病无药物用的问题的同时，提供了一种新的鹅痛风病的临床防治方案，经临床验证，本发明的制备的卵黄抗体对鹅痛风病的防治效果显著。

技术领域

本发明属于卵黄抗体制备技术领域，具体涉及一种治疗由星状病毒引起的鹅痛风病的卵黄抗体的制备方法。

背景技术

从2017年初至今，我国山东、江苏、广东、广西、湖南、河南及安徽等地的雏鹅群中发生一种以内脏和关节痛风为主要症状的传染性疾病，给我国养鹅业造成严重经济损失。该病主要发生于1-20日龄的雏鹅，死亡率最高可达60％。患病雏鹅精神沉郁，卧地倦动，采食减少。剖检表现为内脏器官及关节腔的严重尿酸盐沉积，不同品种、使用不同饲料、不同药物的鹅群均有发生，降低饲料中的蛋白含量、减少饲喂量均无效。该病发生后，我们从广东、湖南、安徽、河南等省份发生痛风的鹅场采集病料100余份，对采集的病料进行了病原分离和动物回归试验，确定导致该病的病原为新型鹅星状病毒。

在此之前，行业内将鹅痛风病因主要归结于饲料营养成分失衡和药物滥用，对于鹅痛风病毒的预防和治疗，目前除了加强消毒和提高鹅场养殖条件外，并没有其他有效的手段。在探明病因的基础上，结合现有养殖行业针对病毒病的防治手段，疫苗免疫和抗体注射治疗是最有效和最经济的防治手段，由于疫苗免疫存在免疫空白期，不适合鹅痛风病的发病特点，因此抗体治疗成为防治鹅痛风病唯一可行的防治措施。卵黄抗体因具有抗体制备经济、易操作、产量大、效价高等优点，因此制备出针对鹅星状病毒的卵黄抗体成为目前防治该病的亟需和首选。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的鹅痛风病的临床防治方案。

本发明的还在于提供一种防治鹅痛风病的卵黄抗体，以解决现有临床中针对鹅痛风病无药可用的问题。

本发明的还在于提供一种防治鹅痛风病的卵黄抗体的制备方法。

为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

一种鹅痛风病卵黄抗体的制备方法，采用灭活的保藏编号为CCTCCNo.V201839的鹅星状病毒免疫蛋鸡，然后从鸡蛋蛋黄中提取纯化卵黄抗体。

鹅痛风病卵黄抗体具体的制备工艺在于包括以下步骤：

1)从鹅痛风临床病例中分离鹅星状病毒，通过PCR鉴定和血清学检测确定其为星状病毒；

2)将上述分离得到的鹅星状病毒经绒毛尿囊膜接种易感鹅胚制备生产用毒；

3)用甲醛灭活生产用毒后，制备成灭活疫苗；

4)用灭活疫苗免疫蛋鸡，收集高免鸡蛋蛋黄分离得到鹅星状病毒卵黄抗体。

所述的鹅星状病毒是从临床感染的雏鹅病变肝脏及肾脏中分离得到的，将其命名为RPVA1061株，该病毒株于2018年6月28日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为：CCTCC No.V201839，保藏单位地址为：湖北省武汉市武昌区八一路299号。

所述生产用毒是从接种后死亡的易感鹅胚的尿囊液、羊水及胚体中，匀浆、冻融、离心收集、超滤浓缩后得到的。

所述生产用毒的甲醛灭活是指：在生产用毒中加入终浓度为0.08-0.25％的甲醛，30-42℃灭活18-24小时。

更进一步的，利用终浓度0.1％的甲醛，在37℃灭活生产用毒18小时。

所述的灭活疫苗为油乳剂灭活疫苗。

更进一步，所述的灭活疫苗的油相为白油。

所述免疫蛋鸡，至少需要进行一次基础免疫和两次加强免疫。