[发明专利]一种检测啶虫脒的试纸条及其制备方法和应用

说明书

一种检测啶虫脒的试纸条及其制备方法和应用，该试纸条包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；其中反应膜上包被有啶虫脒半抗原‑载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线，结合物释放垫上喷涂有啶虫脒单克隆抗体‑胶体金标记物；啶虫脒单克隆抗体是以啶虫脒半抗原‑载体蛋白偶联物作为免疫原制得，啶虫脒半抗原‑载体蛋白偶联物由啶虫脒半抗原与载体蛋白偶联得到，啶虫脒半抗原是由E‑N‑(4‑(6‑氯吡啶‑3‑基)2‑丁烯‑2‑基)氰胺与氨基丙酸反应得到。本发明还提供了应用上述试纸条检测样品中啶虫脒的方法。本发明提供的试纸条和检测方法具有操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低、不受检测设备限制的优点，能对大批量样品中的啶虫脒进行快速检测和现场监控。

技术领域

本发明涉及一种检测啶虫脒的试纸条及其制备方法和应用，具体涉及一种用于检测啶虫脒的胶体金试纸条，其特别适用于烟草中啶虫脒的快速检测。

背景技术

啶虫脒（acetamiprid）属于新烟碱类杀虫剂，新烟碱类杀虫剂是继有机磷、氨基甲酸酯和拟除虫菊酯类杀虫剂之后的一类重要杀虫剂，其主要通过选择性控制昆虫中枢神经系统烟碱型乙酰胆碱酯酶受体（nAChRs），从而阻断昆虫中枢神经系统的正常传导，导致害虫出现全身麻痹进而死亡。啶虫脒是新烟碱类杀虫剂的代表性药剂，在农业生产上被广泛用于种子、叶面和土壤中多种害虫的防治，对蚜虫、叶蝉、烟粉虱、潜叶蛾等害虫防治效果较为理想，在烟草上主要用于烟蚜的防治。农药残留控制是产品质量安全控制的重要内容，是政府机构、生产企业及消费者共同关注的重点。啶虫脒近年来使用广泛，检出率高，屡有超限情况发生。为严把质量关，GB 2763-2016《食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量》中规定啶虫脒在蔬菜中的最大残留限量（MRL）在0.2~1 mg/kg之间，在水果中的最大残留限量在0.5~2 mg/kg之间，在糙米、小麦、棉籽、茶叶中的最大残留限量分别为0.5、0.5、0.1和10 mg/kg，我国尚未制定烟草中啶虫脒的最大残留限量，国际烟草科学研究合作中心（CORESTA）规定烟草中啶虫脒的指导性残留限量为3 mg/kg。因此，为避免啶虫脒残留对人体造成危害以及突破国外贸易壁垒，建立简单、快速、准确、可靠的啶虫脒残留量的检测方法很有必要。

目前，有关啶虫脒残留分析的研究主要集中于气相色谱、液相色谱及气相色谱-质谱联用技术、液相色谱-质谱联用技术。仪器分析方法虽可以实现准确定性定量，但需要复杂昂贵的仪器设备及专业操作人员，加之样品前处理繁琐费时、检测时间长、检测费用高，对于现场检测工作的开展具有局限性。因此，开发一种不受检测设备限制并且能够实现对大批量样品进行快速检测的产品和方法成为迫切需要解决的问题。

发明内容

本发明的目的正是基于上述现有技术状况，提供一种操作简单、灵敏度高、检测速度快、成本低、不受检测设备限制的试纸条，以实现对大批量的啶虫脒样品进行快速检测和现场监控。

为了实现本发明的目的，本发明提供了一种检测啶虫脒的试纸条，该试纸条包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板；其中，所述反应膜上具有包被有啶虫脒半抗原-载体蛋白偶联物的检测线和包被有羊抗鼠抗抗体的质控线，所述结合物释放垫上喷涂有啶虫脒单克隆抗体-胶体金标记物。

所述啶虫脒单克隆抗体是以啶虫脒半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述啶虫脒半抗原-载体蛋白偶联物由啶虫脒半抗原与载体蛋白偶联得到，所述啶虫脒半抗原是由E-N-(4-(6-氯吡啶-3-基)2-丁烯-2-基)氰胺与氨基丙酸反应得到，其分子结构式为：

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所述啶虫脒半抗原的具体制备方法包括以下步骤：