[发明专利]一种检测二甲戊灵的荧光微球免疫层析试纸条及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条，包括底板及在底板上依次搭接粘贴的样品结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述硝酸纤维素膜上固定有检测区和质控区，其特征在于：所述样品结合垫上包埋有荧光微球标记的二甲戊灵单克隆抗体，检测区喷涂有二甲戊灵半抗原-载体蛋白偶联物，质控区喷涂有羊抗鼠抗抗体，所述二甲戊灵单克隆抗体是以二甲戊灵半抗原-载体蛋白偶联物作为免疫原制备获得，所述二甲戊灵半抗原-载体蛋白偶联物是由二甲戊灵半抗原与载体蛋白偶联得到，所述二甲戊灵半抗原是由3-(1-乙基丙氨)-6-甲基-2,4-二硝基苯甲醛与3-肼基丙酸反应得到，其分子结构式为：

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2.如权利要求1所述的检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条，其特征在于：所述二甲戊灵半抗原的制备反应过程如下：

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3.如权利要求1所述的一种检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条，其特征在于：所述荧光微球是直径为100~300nm的用聚苯乙烯包裹荧光物质的微球，其表面连接有—COOH基团，所述荧光物质为异硫氰酸荧光素。

4.如权利要求1所述的一种检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条，其特征在于：所述载体蛋白为牛血清白蛋白、卵清蛋白、血蓝蛋白、甲状腺蛋白、人血清白蛋白中的任意一种。

5.如权利要求1所述的一种检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条，其特征在于：所述羊抗鼠抗抗体是将鼠源抗体免疫羊得到。

6.一种权利要求1-5任一项所述的检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

1）样品结合垫的制备：用市售的荧光微球标记二甲戊灵单克隆抗体，并将其以特定缓冲体系稀释后，将样品结合垫浸泡于稀释缓冲液中，经真空冷冻干燥后制备；

2）硝酸纤维素膜的制备：将二甲戊灵半抗原-载体蛋白偶联物喷涂到硝酸纤维素膜上的检测区范围，制成检测区；将羊抗鼠抗抗体喷涂到硝酸纤维素膜上的质控区范围，制成质控区；

3）组装和剪切：在底板上依次搭接地粘贴包埋有荧光微球标记二甲戊灵单克隆抗体的样品结合垫、固定有检测区和质控区的硝酸纤维素膜及吸水垫，并剪切成所需的宽度即为荧光微球免疫层析试纸条。

7.一种权利要求1-5任一项所述的检测二甲戊灵残留的荧光微球免疫层析试纸条在检测二甲戊灵中的应用，其特征在于包括步骤：

1）样品前处理；

2）用所述试纸条进行检测；

3）用荧光检测仪分析检测结果。