[发明专利]一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法在审
申请号: | 201811106811.4 | 申请日: | 2018-09-21 |
公开(公告)号: | CN109232908A | 公开(公告)日: | 2019-01-18 |
发明(设计)人: | 田振华;马建中;吕斌;王浩;程坤 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
主分类号: | C08H1/00 | 分类号: | C08H1/00 |
代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 徐文权 |
地址: | 710021 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 浸酸皮 未变性天然胶原 三股螺旋结构 胶原 聚丙烯酰胺凝胶电泳 十二烷基硫酸钠 醋酸 蛋白酶 中和预处理 产品纯度 高速离心 透析除盐 海绵状 牛皮胶 溶胶原 图显示 杂蛋白 中间物 保留 除杂 冻干 干重 浸提 条带 盐析 制革 | ||
1.一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、原料预处理,
将浸酸皮加入至氯化钠溶液中,搅拌的过程中加入弱碱以调整pH值至5.5~6.5,取出并清洗皮块,剪碎后备用,得到预处理后的皮块;
S2、未变性天然胶原的提取,
将S1预处理后的皮块加入至含有蛋白酶的醋酸溶液中,搅拌后获得混合液;
S3、未变性天然胶原的纯化,
(1)离心处理S2制得的混合液,得到上清液后加入盐进行盐析,制得悬浊液,离心分离悬浊液后得到沉淀物;将沉淀物溶解于醋酸溶液中制得胶原粗溶液;
(2)在胶原粗溶液中加入盐进行盐析,制得悬浊液,离心分离悬浊液后得到沉淀物,将沉淀物溶解于醋酸溶液中,制得胶原溶液;
(3)将步骤(2)重复0~2次;
(4)离心分离最后一次的胶原溶液,得到沉淀物,将沉淀物溶解于醋酸溶液中进行透析,透析后得到纯化后的未变性天然胶原溶液;
(5)冷冻干燥未变性天然胶原溶液后制得未变性天然胶原海绵。
2.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S1中,氯化钠溶液的质量浓度为6~10%;浸酸皮与氯化钠溶液的料液比为1g:(2~10)L;搅拌温度<25℃。
3.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S1中,弱碱选用碳酸氢钠、碳酸钠或醋酸钠中的至少一种。
4.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S2中,含有蛋白酶的醋酸溶液的制备过程为,将预处理后皮块皮重的1~10%的蛋白酶加入至0.1~2mol/L醋酸溶液中;搅拌时间为48~72h,搅拌温度<10℃。
5.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S2中,蛋白酶为胃蛋白酶、酸性蛋白酶或真菌复合酶中的任一种或两种复配制得。
6.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S3的步骤(1)中,加入盐使其在上清液中的浓度为0.7~3mol/L;沉淀物溶解于浓度为0.1~1mol/L的醋酸溶液中。
7.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S3的步骤(2)中,加入盐使其在溶液中的浓度0.7~3mol/L;沉淀物溶解于浓度为0.1~1mol/L的醋酸溶液中。
8.根据权利要求1所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S3的步骤(4)中,沉淀物溶解在浓度为0.01~1mol/L的醋酸溶液中进行透析,透析液为0.01~1mol/L的醋酸溶液,透析时间为3~5天;透析过程中,每7~9小时更换一次透析液。
9.根据权利要求1-8任意一项所述的一种从浸酸皮中提取未变性天然胶原的方法,其特征在于,S3中,盐为氯化钠、硫酸钠、硫酸铵或硫酸镁中的任一种。
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