[发明专利]一种UHPLC法检测复方甘草片中化学成分的方法

说明书

本发明公开了一种UHPLC法检测复方甘草片中化学成分的方法，所述的UHPLC法检测复方甘草片中化学成分的方法包括检测复方甘草片化学成分和检测复方甘草片血浆代谢成分。本发明检测方法运行时间短，且对复方甘草片样品中的众多组分具有良好的分离度。进一步，该方法具有良好的精密度、重复性和稳定性，适用于复方甘草片的化学成分检测，且同时适用于复方甘草片血浆代谢成分的检测。能够对复方甘草片样品中的成分进行迅速、全面地检测，对复方甘草片样品中的众多组分具有良好的分离度；尤其是能够检测到第二供试品溶液中复杂的微量的入血成分，且分离度良好。因此，采用本发明的方法进行检测，有利于对复方甘草片样品中的组分进行全面阐述。

技术领域

本发明属于医药技术领域，进一步属于医药检测技术领域，具体涉及一种UHPLC法检测复方甘草片中化学成分的方法。

背景技术

复方甘草片是由甘草浸膏粉、阿片粉、樟脑、八角茴香油、苯甲酸钠等组成的复方制剂，收载于中国药典2015年版二部，为保护性祛痰镇咳药，临床上用于一般性咳嗽及上呼吸道感染、急性气管炎初期等的咳嗽治疗，能有效缓解症状。

现代研究表明，复方甘草片中的主要成分是生物碱类、黄酮类及萜类成分，能够预防全身麻醉气管插管后咽喉痛和咳嗽的作用，也可能通过调节树突细胞的成熟状态减轻了气道的反应，从而达到镇咳祛痰的作用。

建立合适的化学成分的检测方法是对药物进行质量控制的重要方面。目前已公开了多种复方甘草片的化学成分的检测方法，但尚未见针对复方甘草片的血浆中代谢物的检测方法。

关于复方甘草片的化学成分的检测方法，孙国祥等公开了用HPLC指纹图谱对复方甘草片实施全质量控制方法（HPLC指纹图谱对复方甘草片实施全质量控制方法，中南药学，2008年03期），采用双定性双定量相似度作为评价指标,建立了复方甘草片HPLC指纹图谱的全质量控制方法。该方法采用RP-HPLC法以Century SIL C18BDS柱(200mm×4.6mm,5μm);以色谱指纹图谱相对指数Fr为指标优化选择指纹图谱检测条件,确定流动相为1%醋酸水-1%醋酸乙腈低压梯度洗脱,紫外检测波长:254nm,柱温:(30.00±0.15)℃,进样量:5μL。该方法所建立HPLC指纹图谱具有较好的精密度和重现性,适用于复方甘草片的质量控制，并认为双定性双定量相似度法是宏观定性定量评价中药制剂质量的最合理、最客观的指纹图谱评价技术。

杨红娟等公开了RP-HPLC同时测定复方甘草片中4个成分含量的方法（杨红娟等，RP-HPLC同时测定复方甘草片中4个成分的含量，药物分析杂志，2013年01期），其采用高效液相色谱法同时测定复方甘草片中吗啡、磷酸可待因、甘草苷和甘草酸的含量， 具体采用PhenomenexLuna-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.02 mol·L-1磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH至4.0)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为220 nm(0～23min,检测吗啡和可待因)、254 nm(23～50 min,检测甘草苷和甘草酸),柱温为35℃。

赵月然等公开了HPLC法同时测定复方甘草片中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸的方法（HPLC法同时测定复方甘草片中甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸，中成药，2014年04期）。该方法采用Dikma Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长为276 nm(0~16 min)、360 nm(16~24 min)、276 nm(24~28 min)、254 nm(28~38 min);体积流量1.0 mL/min;柱温30℃。