[发明专利]利用生物酶制备薯蓣皂苷元的方法及其所用生物材料

权利要求书

1.C和D在制备薯蓣皂苷元中的应用，所述C为FBG1或与FBG1相关的生物材料；所述D为FRG1或与FRG1相关的生物材料；

所述FBG1为A1)或A2)或A3)的蛋白质：

A1)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质；

A2)氨基酸序列是SEQ ID No.2的第19-621位的蛋白质；

A3)在A1)或A2)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；

所述与FBG1相关的生物材料为下述B1)至B8)中的任一种：

B1)编码所述FBG1的核酸分子；

B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；

B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体；

B4)含有B2)所述表达盒的重组载体；

B5)含有B1)所述核酸分子的重组微生物；

B6)含有B2)所述表达盒的重组微生物；

B7)含有B3)所述重组载体的重组微生物；

B8)含有B4)所述重组载体的重组微生物；

所述FRG1为R1)或R2)或R3)的蛋白质：

R1)氨基酸序列是SEQ ID No.4的蛋白质；

R2)氨基酸序列是SEQ ID No.4的第24-670位的蛋白质；

R3)在R1)或R2)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；

所述与FRG1相关的生物材料为下述S1)至S8)中的任一种：

S1)编码所述FRG1的核酸分子；

S2)含有S1)所述核酸分子的表达盒；

S3)含有S1)所述核酸分子的重组载体；

S4)含有S2)所述表达盒的重组载体；

S5)含有S1)所述核酸分子的重组微生物；

S6)含有S2)所述表达盒的重组微生物；

S7)含有S3)所述重组载体的重组微生物；

S8)含有S4)所述重组载体的重组微生物；

所述应用以盾叶新苷为底物。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：B1)中编码所述FBG1的核酸分子为Fbg1基因，所述Fbg1基因为如下C1)-C3)中任一所述的DNA分子：

C1)编码序列是SEQ ID No.1的DNA分子；

C2)编码序列是SEQ ID No.1的第55-1866位核苷酸的DNA分子；

C3)与C1)或C2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码所述FBG1的DNA分子；

S1)中编码所述FRG1的核酸分子为Frg1基因；所述Frg1基因为如下D1)-D3)中任一所述的DNA分子：

D1)编码序列是SEQ ID No.3的DNA分子；

D2)编码序列是SEQ ID No.3的第70-2013位核苷酸的DNA分子；

D3)与D1)或D2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码所述FRG1的DNA分子；

B3)或B4)所述的重组载体为将pPICZαA的EcoR I和Not I识别位点间的片段替换为SEQID No.1的第1-1863位所示的Fbg1基因，保持pPICZαA的其它序列不变得到的重组表达载体，命名为pPICZαA-Fbg1；

B5)至B8)的重组微生物为将pPICZαA-Fbg1导入酵母中得到的表达氨基酸序列是SEQID No.2的蛋白质的重组酵母；

S3)或S4)所述的重组载体为将pPIC9K的EcoR I和Not I识别位点间的片段替换为SEQID No.3的第1-2010位所示的Frg1基因，保持pPIC9K的其它序列不变得到的重组表达载体，命名为pPIC9K-Frg1；

S5)至S8)的重组微生物为将pPIC9K-Frg1导入酵母中得到的表达氨基酸序列是SEQ IDNo.4的蛋白质的重组酵母。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述应用包括：

1)用所述FRG1将盾叶新苷转化为延龄草苷；

2)用所述FBG1将延龄草苷转化为薯蓣皂苷元。