[发明专利]一种基于组织培养的玫瑰种质保存方法

说明书

本发明提供了一种基于组织培养的玫瑰种质保存方法，属于园艺植物种质保存技术领域。该方法包括以下步骤：S1、选种与预处理；S2、外植体灭菌与接种；S3、种质保存材料的获取；S4、试管苗干旱应激处理；S5、试管苗限制生长保存；S6、试管苗恢复生长；S7、试管苗生根；S8、驯化移栽。本发明首次建立了基于组织培养的玫瑰种质保存方法，该方法操作简便，稳定可靠，可重复性强，极大节省了土地、人力和物力，通过限制种质保存材料的生长有效地延长了玫瑰种质的保存时间，种质恢复生长后在增殖、生根、移栽各方面表现良好，是一种切实可行的玫瑰种质资源保存方法，为玫瑰的杂交育种以及商业生产奠定了基础。

技术领域

本发明属于园艺植物种质保存技术领域，具体的涉及一种基于组织培养的玫瑰种质保存方法。

背景技术

玫瑰（学名：Rosa rugosa Thunb.），是蔷薇科蔷薇属的落叶灌木，原产于亚洲东部地区，目前在全球范围内广泛种植，多分布于保加利亚、土耳其、摩洛哥、法国、俄罗斯等北半球国家。现在所称的玫瑰其实是一种广义上的玫瑰，是蔷薇属一系列原种、变种或杂交品种的总称。目前普遍将玫瑰分为两大类，即园林玫瑰和野生玫瑰。园林玫瑰是经过长期大量杂交育种而成的栽培品种，根据用途可分为切花和食用两大类。切花玫瑰花型秀美、色彩艳丽、气味芳香、形色俱佳，具有很高的观赏价值；食用玫瑰作为经济作物，其花朵主要用于食品及提炼香精玫瑰油，具有很高的开发价值和广阔的应用前景。

玫瑰在我国有2000多年的栽培历史。在我国古代，就有把玫瑰花用于泡露、熏茶、入药、酿酒、腌酱及做糕点馅料的习惯。《本草正文》中道：“玫瑰花，清而不浊，和而不猛，柔肝醒胃，疏气活血，宣通窒滞而绝无辛温刚燥之弊，断推气分药之中，最有捷效而最驯良，芳香诸品，殆无其匹”。明代卢和在《食物本草》中说：“玫瑰花食之芳香甘美，令人神爽”^{。中医认为玫瑰花味甘，性温，气味芳香，药性平和，具有理气和血、排毒养颜、和血散淤、开窍化淤、疏肝醒脾、促进胆汁分泌、帮助消化、调节机理的功效。现代研究表明，玫瑰含有蛋白质、维生素、氨基酸、亚油酸、膳食纤维和微量元素等丰富的营养成分，并且含量远远高于普通水果和蔬菜，具有很高的营养价值。玫瑰的功能性成分包括挥发油、多糖、多酚类和黄酮类化合物，具有增强免疫力、抗氧化、降血糖、抗衰老、预防治疗心血管疾病、抗菌、抗病毒、利胆、解毒的作用。迄今，玫瑰已成为我国经济价值较高的药食同源植物，具有较好地药用价值和保健功能。目前筛选出的用于食用的玫瑰品种主要有：滇红玫瑰、墨红玫瑰、紫枝玫瑰、平阴玫瑰、苦水玫瑰、大马士革玫瑰以及千叶玫瑰。}

我国是玫瑰种植大国，拥有丰富的野生玫瑰资源和栽培品种，充分利用我国丰富的种质资源，通过远缘杂交进行驯化育种，培育、筛选适合中国广大地域栽培的高抗性玫瑰新品种群，是我国发展玫瑰产业的当务之急。玫瑰种质资源的收集和保存，是现代玫瑰育种的基础。缺乏好的种质资源，新品种的品性就很难达到优良水平。目前玫瑰种质资源的保存途径主要是采用田间种植保存方法，但是该方法受到外界自然环境的限制，且易感染病毒、病害造成种质资源退化。种质离体保存是近些年来新发展且较为有效的种质保存方法，其中限制生长离体保存法应用最广。该方法以组织培养技术为基础，通过改变试管苗的生长环境，使细胞生长降至最小限度，延长继代间隔时间，减少继代次数，以避免频繁继代造成污染或引发种质变异，从而能有效地保证种质的遗传稳定性，实现植物种质资源的中长期保存目的。

目前种质限制生长离体保存技术已成功地应用于大蒜等多种无性繁殖植物种质资源保存，但未见有关玫瑰离体保存技术的报道。发明人通过研究限制玫瑰种质资源生长的主要影响因素及指标，摸索出了一种稳定可靠的玫瑰种质保存方法，为玫瑰种质资源中长期保存提供理论和实践依据，更为玫瑰的杂交育种以及商业生产工作奠定了基础。

发明内容

本发明的目的是克服目前田间保存玫瑰种质资源的不足，提供一种基于组织培养的玫瑰种质保存方法，该方法不受自然条件的限制，可实现种质的中长期保存，并且种质保存效果良好，能够达到玫瑰种质资源研究利用的要求。