[发明专利]一种延缓衰老的干细胞来源外泌体制剂

说明书

本发明是一种利用胚胎干细胞分泌的外泌体来延缓间充质干细胞衰老并增强其治疗效果的技术手段。胚胎干细胞具有很强的自我更新和多向分化的潜能，但由于其存在免疫排斥和伦理道德等方面的限制，使其不能在医学上进行广泛应用。而外泌体是由细胞分泌的一种包含多种RNA和蛋白质的囊泡。近些年来，间充质干细胞已经广泛应用于临床治疗中，但是随着在体外的传代扩增，间充质干细胞会逐渐衰老从而减弱其治疗效果。本发明是利用胚胎干细胞分泌的外泌体处理衰老的间充质干细胞，从而进一步提高间充质干细胞的治疗效果。

技术领域

本发明涉及利用胚胎干细胞分泌的外泌体来延缓间充质干细胞衰老并增强其治疗效果的技术手段，属于组织工程与新医药技术领域。

背景技术

胚胎干细胞是一种高度未分化的细胞，它能够在体外培养时无限增殖，并且具有高度的自我更新和多向分化的潜能。胚胎干细胞可以分化为所有类型的细胞，是基因治疗最为理想的靶细胞。由于这些优良特性，胚胎干细胞被称为“种子细胞”，为临床的组织器官移植提高大量的原料。但是由于胚胎干细胞在临床应用中受到免疫排斥和伦理道德等方面的约束，限制了其在临床上的应用，因此，科学家们正在寻找一些其他途径代替胚胎干细胞发挥相关的治疗效果。

外泌体通常被认为是由细胞内部多囊泡体向内出芽所产生的微囊泡，在多囊泡体与细胞膜融合时，将其内部的微囊泡释放至细胞膜外，形成外泌体。外泌体的直径约为40-100 nm，其内部富含细胞内具有生物活性的信号分子，包括DNA、RNA、microRNA及蛋白质等。所有的培养的细胞类型都可以分泌外泌体，包括干细胞、内皮细胞、免疫细胞等，外泌体也天然存在于体液中，包括乳液、尿液、血液、唾液等。被释放至细胞外的外泌体可以通过不同的途径进入靶细胞内，发挥其生物学功能。第一，与细胞分泌的可溶性旁分泌因子类似，外泌体可以通过与靶细胞膜表面受体结合，触发靶细胞内的信号转导通路，并进一步调节靶细胞内的生物学过程；第二，外泌体可以被靶细胞内在化，这一过程依赖于网格蛋白介导的内吞作用、脂筏介导的内吞作用及胞饮作用等；第三，外泌体可以通过与靶细胞膜融合，直接将外泌体内携带的活性物质递送到靶细胞内。外泌体介导了细胞间的通讯，它的功能取决于它所来源的细胞类型，参与肿瘤的迁移、机体免疫应答、细胞分化、细胞迁移等方面。

间充质干细胞是干细胞家族的主要成员，是一种多能干细胞，在体内或体外经过诱导，可分化为脂肪、软骨、肌肉、神经、心肌等组织。间充质干细胞存在于多种组织，包括骨髓、脐带组织、脐带血、胎盘组织、脂肪组织等，具有多向分化的潜能。我国已将间充质干细胞用于治疗临床上的很多疑难疾病，如脑瘫、系统性红斑狼疮、糖尿病、肝硬化、中风等，并且取得了明显的疗效。随着技术的进步，对间充质干细胞的需求量也随之增大，而在体外培养间充质干细胞过程中，随着传代次数增加，间充质干细胞出现衰老相关的特点，如细胞形态变得扁平，增殖速度减慢，DNA损伤程度增大，细胞凋亡增多，端粒缩短等。衰老的细胞在临床上的治疗效果会有一定程度的降低，所以科学家们尝试多种方式来缓解干细胞的衰老，并且为早衰症等疾病的治疗提供一定的思路。

发明内容

本发明是一种利用胚胎干细胞分泌的外泌体来延缓间充质干细胞衰老并增强其治疗效果的技术手段

本发明是一种利用胚胎干细胞来源的外泌体处理复制性衰老的胎盘来源间充质干细胞，从而缓解间充质干细胞的衰老，并进一步提高其治疗效果。

所述外泌体为干细胞来源的外泌体，所述干细胞包括胚胎干细胞，脂肪间充质干细胞、骨髓间充质干细胞、脐带间充质干细胞、胎盘间充质干细胞等。

本发明可以有效缓解间充质干细胞衰老，改善细胞形态，提高细胞增殖速度，提高干细胞干性，减弱DNA损伤程度等，并有效的提高间充质干细胞对皮肤损伤的治疗效果。

附图说明

图1为外泌体特征的鉴定，该外泌体为胚胎干细胞来源的外泌体。

图2为外泌体可以被细胞内吞从而发挥作用。